авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 ||

Эколого-функциональные аспекты микробной ремедиации нефтезагрязнённых почв

-- [ Страница 2 ] --

Было установлено, что через 60 сут. очистки чернозём южный (эксперимент Э1.4.) по всем изученным показателям был нетоксичным для проростков редиса (табл. 5). При стимуляции естественного микробного сообщества путём внесения удобрения, полива и рыхления почвы токсичность почвы была ниже по показателю средней длины корня и ростка проростка редиса, чем при самоочищении.

В ходе исследований нами был разработан метод определения токсичности нефтезагрязнённой почвы после биоремедиации по дегидрогеназной активности бактерий. Дегидрогеназы высоко чувствительны к действию ядовитых веществ, в присутствии которых их активность снижается, что позволило нам путём сравнения количества ТФФ, образованного дегидрогеназами микробного штамма D. maris АМ3, в опытах и контроле оценить степень токсичности исследуемых образцов почвы.

Таблица 4 – Фитотестирование почвы на проростках пшеницы и редиса Тестовое Варианты Длительность Показатель растение эксперимента эксперимента, Всхожесть Средняя длина корня Средняя длина ростка сут.

% от мм % от мм % от % контроля контроля контроля Эксперимент Э1.1.

Пшеница сорта контроль, 92,5±2,24 100 119,1±3,11 100 20,8±0,45 чистая почва «Саратовская стимуляция 29» 0 80,0±1,83 86,5±2,33 46,2±0,82 38,8±0,92 4,1±0,13 19,7±0, 90 82,5±2,65 89,2±2,12 70,3±1,27 59,0±0,57 12,7±0,33 61,1±0, аугментация 0 80,0±1,83 86,5±2,33 46,2±0,82 38,8±0,92 4,1±0,13 19,7±0, 90 86,6±2,23 93,6±2,93 73,4±1,56 61,3±2,06 11,3±0,41 54,3±1, Редис сорта контроль, 95,0±2,75 100 40,2±1,07 100 27,4±0,49 чистая почва «Заря» стимуляция 0 85,0±3,04 89,5±3,23 11,6±0,32 28,9±0,52 4,0±0,18 14,2±0, 90 98,3±2,77 103,5±3,46 36,5±0,94 90,8±2,04 17,8±0,73 65,0±1, аугментация 0 85,0±3,04 89,5±3,23 11,6±0,32 28,9±0,52 4,0±0,18 14,2±0, 90 95,8±3,05 100,8±3,45 47,2±1,24 117,4±3,10 17,6±0,84 64,2±1, Эксперимент Э2.

Пшеница сорта контроль, 95,0±1,97 100 138,5±2,78 100 34,05±1,22 чистая почва «Саратовская стимуляция 29» 0 90,0±1,58 94,7±2,58 100,6±2,42 72,6±2,24 17,9±1,96 52,5±1, 90 86,7±2,88 91,2±3,11 92,8±2,56 67,0±2,18 13,1±0,63 38,3±0, аугментация 0 83,3±3,36 87,7±3,41 72,9±1,95 52,6±0,86 12,0±0,38 35,2±1, 90 85,0±1,86 89,5±1,98 85,3±2,29 61,6±0,76 12,4±0,88 36,3±1, Редис сорта контроль, 82,5±2,57 100 24,9±1,05 100 16,3±0,56 чистая почва «Заря» стимуляция 0 88,3±3,54 107,1±3,06 40,7±3,31 163,3±3,77 7,4±0,20 45,5±0, 90 91,6±3,77 111,0±3,13 38,7±2,62 155,4±3,15 8,0±0,41 49,4±0, аугментация 0 83,3±3,35 101,0±3,89 40,1±1,56 160,9±3,06 7,6±0,38 46,9±0, 90 100,0±3,70 121,2±3,89 49,2±1,29 197,4±3,18 7,4±1,04 45,3±1, Таблица 5 – Оценка токсичности почвы с помощью фитотестирования на проростках редиса и по дегидрогеназной активности штамма D. maris АМ3 (эксперимент Э1.4.) Варианты Длительность Показатель эксперимента эксперимента, сут. Всхожесть семян Средняя длина корня Средняя длина ростка Содержание ТФФ % от мм % от мм % от мкг/мл % от % контроля контроля контроля контроля Контроль, чистая 92,5±3,76 100 29,5±1,87 100 25,3±2,41 100 222,0±3,28 почва Самоочищение 0 87,5±2,89 94,6±2,96 26,4±2,89 89,4±2,97 20,8±1,49 82,2±2,02 60,1±1,18 27,1±1, 30 84,3±2,44 91,1±2,48 31,2±2,42 105,7±2,76 15,5±1,12 61,2±2,11 55,5±1,01 25,0±1, 60 109,6±2,35 101,4±2,58 30,2±1,48 102,1±3,09 36,2±1,95 142,9±2,97 24,4±0,29 11,0±0, Стимуляция 0 79,5±2,45 86,0±2,63 25,13±2,93 85,2±2,96 20,3±0,49 80,2±2,54 60,1±1,18 27,1±1, 30 80,3±2,65 86,8±2,76 32,0±1,95 108,6±3,08 12,2±0,45 48,2±1,37 83,3±1,18 37,5±1, 60 85,3±2,91 92,2±2,95 31,9±0,97 108,3±2,98 42,2±1,49 166,7±3,07 40,6±1,31 18,3±1, Следует отметить, что разработанный и апробированный нами метод биотестирования прост, хорошо воспроизводим, обеспечивает получение точных и стабильных результатов. Для анализа используются непосредственно образцы почвы, а не почвенная вытяжка, как в методах на основе гидробионтов (инфузорий, дафний и др.), что позволяет наиболее достоверно оценить токсичность почвы. Метод обладает высокой чувствительностью, он позволяет регистрировать возможность образования в почве опасных метаболитов токсикантов.

При оценке токсичности нефтезагрязнённого чернозёма южного (эксперименты Э1.1. и Э1.4.) по дегидрогеназной активности тест-организма АМ3 наблюдались тенденции, обнаруженные при D. maris фитотестировании: через 30 сут. ремедиации показана средняя степень токсичности почвы (табл. 5). Установлено, что очистка почвы, основанная на стимуляции аборигенной микрофлоры, способствует снижению токсичности почвы в большей степени, чем процесс самоочищения, а использование штамма-интродуцента снижает токсичность почвы сильнее, чем стимулирующие приёмы, через 30 сут., т.е. в период максимального развития и активности почвенных микроорганизмов. В конце очистки в обоих экспериментах обнаруживались различия между двумя способами оценки токсичности почвы: почва оказалась не токсичной для растений, но ещё токсичной для микробных ферментов, что свидетельствует о необходимости использования нескольких оптимальных биотестов для достоверной оценки токсичности почвы после биоремедиации.

Изменение содержания нефтяных углеводородов и ряда агрохимических показателей в ходе ремедиации. Эксперименты показали, что первый месяц после начала ремедиационных мероприятий загрязнённой почвы характеризовался максимальным развитием аборигенной и интродуцированной микрофлоры в почве, активностью дегидрогеназ в почве и максимальной скоростью деструкции нефтяных углеводородов.

В ходе экспериментов было установлено, что при стимуляции естественного почвенного сообщества внесением минерального удобрения совместно с регулярным поливом и рыхлением почвы (эксперимент Э1.4.) убыль общих нефтяных углеводородов в чернозёме южном в ходе очистки была выше на 13-15%, чем при самоочищении. В случае свежего нефтяного загрязнения чернозёма южного (эксперимент Э1.1.) интродукция D. maris АМ3 способствовала убыли общих нефтяных углеводородов на 39% в почве за 30 сут., что было в два раза выше степени их разложения аборигенным микробным сообществом при стимуляции путём внесения удобрения со структуратором, регулярного полива и рыхления почвы, которая составила 19% за данный период (рис. 20). Значительная разница в убыли нефти свидетельствовала о высокой активности интродуцированного штамма в течение первого месяца очистки. Через 90 сут. эта разница исчезла.

Разрушение нефтяных углеводородов в почве при внесении штамма достигла 66, а при стимуляции – 60%.

Деструкция, % 0 10 20 30 40 50 60 70 80 сутки Рисунок 20 – Степень деструкции общих нефтяных углеводородов в эксперименте Э1.1.

(1 – стимуляция, 2 – аугментация) и Э2. (3 – стимуляция, 4 – аугментация) В смешанном грунте с многолетним загрязнением нефтепродуктами степень его очистки при внесении нефтеокисляющего штамма АМ3 была даже несколько ниже в первый месяц, чем при биостимуляции, и сходные результаты наблюдались через 3 мес. очистки (50 и 48% в почве при стимуляции и аугментации соответственно). При ремедиации грунта происходило некоторое увеличение концентрации нефтепродуктов, наблюдаемое в период от 30 до 60 сут. в варианте с использованием стимуляции и от 45 до 75 сут. в варианте с интродукцией штамма, что можно объяснить снижением связывания загрязнителя с грунтом за счёт процессов, происходящих при ремедиации (Maila, Cloete, 2005), кроме того, под воздействием температуры, влажности и механической обработки разрушились агрегаты с высоким содержанием твёрдых нефтепродуктов, что можно было наблюдать визуально.

В условиях свежего загрязнения нефтью аборигенной микрофлоре необходимо время для адаптации к загрязнителю, поэтому, на наш взгляд, внесение активного штамма-деструктора ускоряло процесс очистки в первый месяц. Многолетнее загрязнение, выступающее в роли селекционирующего фактора для УОМ, создало повышенный деструктивный потенциал микробных сообществ, который реализовался при использовании оптимального комплекса стимулирующих мероприятий.

Показано, что как при свежем нефтяном загрязнении почвы, так и многолетнем загрязнении грунта, убыль нефтепродуктов происходила в основном за счёт разложения парафино-нафтеновых углеводородов, через 90 сут. степень их деградации составляла 53-58%, существенной разницы между двумя способами обработки не наблюдалось. Хорошо также разрушались моно- и бициклические ароматические соединения в почве с интродуцентом и без него – на 52 и 59% при свежем нефтяном загрязнении чернозёма южного и на 49 и 39% – при многолетнем загрязнении грунта. При внесении штамма в свежезагрязнённую почву эффективнее разрушалась фракция ПАУ (41 против 18% при стимуляции) и спирто-бензольных смол (41 против 23% при стимуляции). При многолетнем загрязнении грунта, наоборот, концентрация ПАУ в почве при использовании стимулирующих приёмов снижалась сильнее, чем в почве со штаммом. Снижения содержания фракции смол в грунте не происходило, через 90 сут. оно было выше исходного.

В смешанном грунте с многолетним загрязнением нефтепродуктами исследовали динамику агрохимических показателей. Было показано увеличение содержания общего углерода через 45 сут. ремедиации, что прямо коррелировало с увеличением содержания общих нефтепродуктов в почве в этот период. Содержание водорастворимого углерода увеличивалось через 45 сут. в почве со штаммом D. maris АМ3, и через 90 сут. оно было выше, чем в исходной почве. Наблюдаемые тенденции можно объяснить тем, что в смешанном грунте происходят разнонаправленные процессы. С одной стороны, развитие почвенной микрофлоры связано с потреблением запасов растворимого углерода, с другой – разрушение нефтепродуктов с давним сроком загрязнения сопровождается увеличением содержания водорастворимого углерода в почве. Содержание нитратного азота в обоих вариантах очистки на протяжении всего эксперимента было низким.

Содержание аммонийного азота и подвижного фосфора в первой половине ремедиации снижалось, что было сопряжено с интенсивными процессами окисления нефтепродуктов, в последний месяц – увеличивалось, вероятно, вследствие высвобождения связанного аммонийного азота из почвы в процессе очистки и подвижного фосфора в ходе минерализации микробной биомассы. Изменения рН почвы в ходе очистки были несущественными.

Обоснование использования приёмов биоремедиации почв при свежем и многолетнем нефтяном загрязнении. В ходе экспериментов обнаружено, что при самоочищении почвы от свежего нефтяного загрязнения не происходило существенного увеличения содержания ОГМ и УОМ, активности почвенных дегидрогеназ и каталаз, численность денитрификаторов и нитрификаторов, активность липаз и уреаз в почве была меньше, чем при использовании приёма стимуляции естественного микробного сообщества. Токсичность этой почвы, напротив, была выше, чем при стимуляции. В связи с этим, убыль нефтяных углеводородов при самоочищении почвы на всём протяжении эксперимента была ниже на 13-15%, чем при стимуляции естественного микробного сообщества. Таким образом, на основании эффективности очистки почвы от свежего нефтяного загрязнения показано преимущество приёма стимуляции аборигенной микрофлоры перед самоочищением.

При внесении штамма D. maris АМ3 в чернозём южный со свежим нефтяным загрязнением на всём протяжении эксперимента следующие показатели биологической активности почвы были выше, чем при стимуляции аборигенной микрофлоры: численность ОГМ, УОМ, почвенное дыхание, активность дегидрогеназ, липаз и уреаз. Это способствовало, по нашему мнению, интенсификации процессов биодеградации нефтяных углеводородов, степень разрушения которых после первого месяца очистки была в два раза выше, чем при биостимуляции. Это преимущество D. maris АМ3 при необходимости может использоваться специалистами биотехнологами для ускорения ремедиации в климатических зонах с коротким тёплым сезоном. Почва со штаммом-интродуцентом также отличалась меньшей токсичностью в конце очистки по результатам фитотестирования и тестирования по дегидрогеназной активности D. maris АМ3 на определённом этапе ремедиации (30 сут.).

Ускорение и улучшение качества очистки загрязнённой почвы под влиянием штамма D. maris АМ3 позволяет рекомендовать его для ремедиации почв при свежем нефтяном загрязнении.

Сохранение жизнеспособности и активности штамма при повышенной кислотности среды даёт возможность применять его в условиях, когда естественные микробные сообщества малочисленны или не способны полноценно функционировать.

В смешанном грунте с многолетним загрязнением нефтепродуктами внесение D. maris АМ3 не ускоряло очистку, при использовании приёмов стимуляции и аугментации наблюдалась одинаковая скорость и степень разложения нефтяных углеводородов. И при выборе способа очистки приём стимуляции может быть рекомендован как экономически более выгодный. В то же время, штамм-интродуцент положительно влиял на биологическую активность грунта. Наблюдались повышенные значения численности ОГМ от до 30 сут., УОМ – от 7 до 45 сут., почвенного дыхания – от 7 до 14 сут., активности каталаз – в период 7 и 45 сут., липаз – 45 и 75 сут. по сравнению со стимуляцией естественного микробного сообщества. Также существенным было снижение фитотоксичности очищенного грунта под влиянием D. maris АМ3, что связано, вероятно, с ингибирующим действием данного штамма на фитопатогенные микромицеты. Влияние штамма D. maris АМ3 на качество очистки, что существенно для восстановления плодородия почв, предусматривает применение данного микроорганизма для очистки почвы или грунта от многолетнего нефтяного загрязнения.

7. ПОЛУЧЕНИЕ НЕФТЕОКИСЛЯЮЩЕГО БИОПРЕПАРАТА ПУТЁМ СТИМУЛЯЦИИ АБОРИГЕННОЙ УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩЕЙ МИКРОФЛОРЫ Реализовать принцип создания оптимальных условий для развития природной нефтеокисляющей микрофлоры в ряде случаев проще в лабораторных или промышленных биореакторах. Нами оценивалась эффективность деградации углеводородов нефти в почве и воде с помощью технологии, основанной на обогащении образцов загрязнённой почвы в лабораторных условиях аборигенными УОМ и индукции их ферментативных систем, катализирующих деградацию углеводородов нефти.

Для получения жидкой обогащённой культуры использовалась почва, длительное время загрязнённая нефтью, поскольку в этом случае УОМ микробного почвенного сообщества уже адаптированы и частично активизированы. На первом этапе образцы нефтезагрязнённой почвы культивировали в жидкой среде с разными добавками. В ходе проведённых исследований было установлено, что среди исследуемых добавок (табл. 6), стимулирующих развитие почвенных УОМ при культивировании их в виде почвенной суспензии, оптимальным был следующий комплекс, г/л: нефть – 5,0, минеральные компоненты – 10,0 и синтетическое моющее средство (СМС) – 0,2.

Таблица 6 – Варианты стимуляции развития УОМ в почвенной суспензии Вариант Вносимые добавки, г/л минеральные нефть парекс глюкоза СМС синтанол компоненты 10,0 5,0 - - - 10,0 - 5,0 - - 10,0 5,0 - - - 0, 10,0 5,0 - - 0,2 10,0 5,0 - 10,0 - 10,0 - - 10,0 - 10,0 - - - - Количество УОМ возрастало на пять порядков (до величин кратных клеток) по сравнению с исходным содержанием (рис. 21).

Повторное внесение питательных субстратов стимулировало развитие в среде УОМ в среднем на два порядка. При этом наибольший эффект оказывало добавление L-бульона и мелассы по отдельности и в различных комбинациях. При аналогичной подготовке обогащённой культуры в твёрдой фазе количество УОМ увеличивалось примерно в 700 раз, хотя их максимальное содержание в почве было также около 109 КОЕ/г.

После предварительной обработки образцы, являющиеся по сути биопрепаратом – источником активной нефтеокисляющей микрофлоры, вносили в загрязнённые образцы почвы и воды одновременно с необходимыми добавками, повышающими эффективность утилизации загрязнителя. Для этой цели был использован лучший вариант жидкой обогащённой культуры с максимальной численностью УОМ (табл. 6, вариант №4), который вносили в количестве 107 КОЕ/г(мл) с различными комбинациями минеральных добавок и СМС (табл. 7).

10 5 8 lg числа УОМ 0 3 6 9 12 сутки Рисунок 21 – Динамика численности УОМ в процессе культивирования почвенной суспензии с внесением стимулирующих добавок (номер вариантов соответствует табл. 6) Таблица 7 – Варианты очистки загрязнённых образцов с помощью жидкой обогащённой культуры УОМ Вариант Образцы Исходная Вносимые добавки, г/л(кг) концентрация минеральные СМС нефти, г/л(кг) компоненты Вода 1. 5,0 10, то же 2. 5,0 10,0 0, Контроль 1. -//- 5,0 - 3. -//- 50,0 10, 4. -//- 50,0 10,0 0, Контроль 2. -//- 50,0 - Почва 1. 5,0 10, то же 2. 5,0 10,0 0, Контроль 1. -//- 5,0 - 3. -//- 50,0 10, 4. -//- 50,0 10,0 0, Контроль 2. -//- 50,0 - Определение остаточного содержания нефтепродуктов в очищаемых образцах обнаружило, что использование обогащённой жидкой культуры позволило деградировать нефть за 15 сут. на 98,9-100% от исходного содержания 5 г/л(кг) как в воде, так и в почве (рис. 22). При содержании в опытных образцах нефти в количестве 50 г/л(кг) её деструкция в почве составляла 65,0-66,8%, в жидкой среде наблюдали близкие результаты: 62,8 65,0%. В контрольных вариантах убыль нефти составляла: 2,7% в водной среде и 14,4% в почве. Таким образом, степень очистки с помощью биопрепарата была выше по сравнению с контролем в 4-8 раз в почве и в 18 24 раза в воде в зависимости от концентрации в них нефти (5 и 50 г/л(кг)).

Деградация, % концентрация 20 50 нефти, г/л контроль 1 варианты А Деградация, % концентрация 20 нефти, г/л контроль 1 варианты Б Рисунок 22 – Степень деградации нефти в загрязнённых водных (А) и почвенных (Б) образцах (номер вариантов соответствует табл. 7) за 15 сут. использования жидкой обогащённой культуры Такой способ активизации аборигенных микробных сообществ почвы может иметь большие перспективы для практического использования, он экологически безопасен, достаточно экономичен и легко осуществим для очистки загрязнённых объектов даже большого масштаба.

В целом, проведённые исследования, основанные на комплексной оценке изменений, происходящих в почве и её микробных сообществах в условиях нефтяного загрязнения при использовании технологий биоремедиации, продемонстрировали пути повышения эффективности различных приёмов микробной очистки нефтезагрязнённых почв. Одним из них является внесение исследованных уникальных нефтеокисляющих микроорганизмов D. maris АМ3 и Bacillus sp. УН2/5, способных ускорять очистку и улучшать её качество. Использование специализированных углеводородокисляющих бактерий для ликвидации нефтяного загрязнения в кислых почвах отличается научной новизной. Установленная в ходе исследований целесообразность применения штаммов D. maris АМ3 и Bacillus sp. УН2/5 для очистки почв, различающихся по своим свойствам и по срокам нефтяного загрязнения, значительно расширила современные представления о возможностях нефтеокисляющих микроорганизмов.

Полученные новые данные о биологических и эколого-функциональных свойствах микробного сообщества нефтешлама с низким значением рН, в том числе, обнаруженная плазмидная детерминация свойств ацидотолерантности и деструкции нефтяных углеводородов у микроорганизмов сообщества, способствуют пониманию устойчивого функционирования естественных микробных сообществ в экстремальных условиях и создают предпосылки для использования природных процессов в технологиях очистки.

ВЫВОДЫ 1. Выделенные из микробного сообщества нефтешлама (рН 1,15) 13 штаммов, идентифицированные как Corynebacterium spр., Dietzia maris и Bacillus sp., являются умеренными ацидофилами, утилизирующими нефтяные углеводороды в широком диапазоне рН.

2. Новый штамм D. maris АМ3 обладает рядом функциональных и экологических преимуществ, к которым относятся: рост в широком диапазоне рН (4-9) и температур (10-40оС), в присутствии 10% NaCl, способность к деструкции алкановых и ароматических углеводородов нефти, биоэмульгирующая активность по отношению к нефти, наличие трансмиссивной катаболической плазмиды с высокой стабильностью.

После культивирования на углеводородных субстратах увеличивается гидрофобность клеток и нефтеокисляющая активность штамма D. maris АМ3.

3. Свойство ацидотолерантности у бактерий Corynebacterium spр. и деградации нефтяных углеводородов у штамма D. maris АМ3, входящих в микробное сообщество нефтешлама, детерминируется плазмидными генами.

4. Микроорганизмы D. maris АМ3 и Bacillus sp. УН 2/5, интродуцированные в нефтезагрязнённые кислые и нейтральные почвы, отличаются высокой жизнеспособностью. Интродукция штаммов в почву со свежим нефтяным загрязнением ускоряет очистку в 2 раза в течение первого месяца ремедиации по сравнению с приёмом стимуляции, интенсифицирует биологическую активность почвы и способствует снижению её токсичности.

5. Иммунохимические методы анализа применимы для выявления штамма D. maris АМ3 в почве в процессе биоремедиации и количественной оценки динамики его численности. С помощью твёрдофазного иммуноферментного анализа установлено, что при интродукции штамма D. maris АМ3 в почву, его максимальное развитие происходит через 7- суток (на 1-3 порядка в зависимости от почвы и загрязнителя).

6. При свежем нефтяном загрязнении приём стимуляции естественного микробного сообщества почвы способствует более эффективной убыли нефтяных углеводородов, активизации биологической активности почвы и снижению её токсичности по сравнению с самоочищением, а в случае многолетнего загрязнения этот приём сравним по степени деструкции нефтепродуктов с интродукцией штамма D. maris АМ3, который на определённых этапах ремедиации повышает биологическую активность и снижает токсичность почвы.

7. Показатели активности почвенных ферментов: дегидрогеназ, каталаз, липаз и уреаз, отражающие направленность процессов биодеградации нефтяных углеводородов в почве, обусловленных развитием и активизацией аборигенных и интродуцированных микроорганизмов, а также показатели токсичности очищенной почвы, определяемые по дегидрогеназной активности тест-микроорганизма, являются индикаторными для мониторинга процессов биоремедиации.

8. Оптимальная комбинация стимулирующих добавок, включающая нефть, минеральные компоненты и СМС (5, 10 и 0,2 г/л), активизируя аборигенные углеводородокисляющие микроорганизмы в образцах загрязнённой почвы, способствует получению биопрепаратов в виде почвенной суспензии, которые эффективно очищают нефтезагрязнённую почву и воду.

Список работ, опубликованных по теме диссертации * – публикации в печатных изданиях, рекомендованных Перечнем ВАК РФ Научные статьи:

1. Плешакова Е.В., Турковская О.В. Создание и использование биокатализаторов для деструкции минеральных масел // Биотехнология. – 1993. – № 11-12. – С. 46-49.

2. Турковская О.В., Муратова А.Ю., Плешакова Е.В., Панченко Л.В. Утилизация отработанных моющих растворов с помощью микроорганизмов // Химия и технология воды. – 1996. – Т. 18, № 2. – С. 212-216.

3. Turkovskaya O.V., Muratova A.Yu., Panchenko L.V., Pleshakova E.V. Utilization of spent detergent solution and lubricating cooling liquids // Global Environmental Biotechnology / Ed. D.L. Wise. – Amsterdam: Elsevier Science B.V., 1997. – P. 799 805.

4. Плешакова Е.В., Тимофеева З.Ю. Изучение стабильности микробной деструкции анионного поверхностно-активного вещества сульфонола // Химия для медицины и ветеринарии: Сб. науч. тр. – Саратов: Изд-во СГУ, 1998. – С. 146-150.

* 5. Плешакова Е.В., Муратова А.Ю., Турковская О.В. Деградация минерального масла штаммом Acinetobacter calcoaceticus // Прикл. биохим. и микробиол. – 2001.

– Т. 37, № 4. – C. 398-405.

6. Panchenko L., Turkovskaya O., Volkov M., Muratova A., Dubrovskaya Y., Pleshakova Y., Pozdnyakova N. Large scale in situ bioremediation of oil-slime // Proceeding of 3rd International Conference OIL POLLUTION: Prevention, Characterization, Clean Technology. – Gdask, Poland, 2002. – P. 25-33.

7. Pleshakova Ye.V., Pozdnyakova N.N., Turkovskaya O.V. Stimulation of the indigenous hydrocarbon-oxidizing microflora in the oil-contaminated soil // Proceeding of 3rd International Conference OIL POLLUTION: Prevention, Characterization, Clean Technology – Gdask, Poland, 2002. – P. 33-41.

8. Турковская О.В., Панченко Л.В., Дубровская Е.В., Плешакова Е.В., Муратова А.Ю., Позднякова Н.Н., Игнатов В.В. Биотехнологии для очистки окружающей среды // Высокие технологии – путь к прогрессу: Сб. науч. тр. – Саратов: Научная книга, 2003. – С. 76-81.

9. Pleshakova E., Dubrovskaya E., Turkovskaya O. Stimulation of the activity of oil oxidizing microorganisms in contaminated soil // Proceeding of 8th International FZK/TNO Conference on Contaminated Soil. – Gent, Belgium, 2003. – 8 p.

* 10. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В., Турковская О.В. Приемы стимуляции аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры // Биотехнология. – 2005. – № 1. – С. 42-50.

11. Плешакова Е.В., Матора Л.Ю., Турковская О.В. Интродукция нефтеокисляющего штамма Dietzia maris в загрязненную почву // Сборник статей / Под ред. О.В. Турковской. – Саратов: Научная книга, 2005. – С. 148-156.

* 12. Плешакова Е.В., Позднякова Н.Н., Турковская О.В. Получение нефтеокисляющего биопрепарата путем стимуляции аборигенной углеводородокисляющей микрофлоры // Прикл. биохим. и микробиол. – 2005. – Т. 41, № 6, – С. 634-639.

13. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В., Турковская О.В. Эффективность технологий микробной очистки почв от нефтяного загрязнения // Энергосбережение в Саратовской области. – 2006. – № 2 (24). – С. 17-19.

14. Pleshakova E., Dubrovskaya E., Turkovskaya O. Stimulation of the activity of oil oxidizing microorganisms in contaminated soil // New Research on the Environment and Biotechnology / Eds. A.E. Kuznetsov and G.E. Zaikov. – Nova Science Publishers, Inc., New York, 2006. – P. 37-49.

15. Слюзова О.В., Груздева М.С., Плешакова Е.В. Снижение воздействия кадмий содержащих токсичных веществ на живые организмы // Энергосбережение в Саратовской области. – 2007. – № 2 (28). – С. 24-26.

16. Плешакова Е.В., Голубев С.Н., Турковская О.В. Биодеградация нефтяных углеводородов штаммом Dietzia maris, ее генетические особенности // Известия Саратовского университета. Серия Химия. Биология. Экология. – 2007. – Т. 7, Вып. 1. – С. 54-57.

* 17. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В., Турковская О.В. Сравнение эффективности интродукции нефтеокисляющего штамма Dietzia maris и стимуляции естественных микробных сообществ для ремедиации загрязнённой почвы // Прикл. биохим. и микробиол. – 2008. – Т. 44, № 4. – С. 430-437.

18. Плешакова Е.В., Голубев С.В., Колесникова О.В. Изучение реизолятов штамма Dietzia maris AM3 после его культивирования на углеводородных субстратах // Биологические науки Казахстана. – 2008. – № 1. – С. 53-59.

19. Плешакова Е.В., Шейкина А.С. Восстановление численности микроорганизмов азотного цикла в процессе рекультивации нефтезагрязненной почвы // Энергосбережение в Саратовской области. – 2008. – №3 (33). – С. 37-39.

20. Плешакова Е.В. Генетический анализ микробных консорциумов модельной установки для очистки сульфонолсодержащих сточных вод, возможности его практического использования // Вода и экология. Проблемы и решения. – 2008. – № 3. – С. 50-56.

21. Dubrovskaya E., Pleshakova E., Turkovskaya O. Using molasses for stimulation of the degradative and activities of the microbial community in soil contaminated with oil shale liquid fuel // Soil Contamination: New Research / Ed. A.N. Dubois. – USA: Nova Science Publishers, 2008. – Р. 121-138.

22. Плешакова Е.В., Нежинская Е.Г. Изменение биологической активности нефтезагрязненной почвы при самоочищении и использовании технологии стимуляции аборигенной микрофлоры // Вестник ОГУ. Материалы IV Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы экологии Южного Урала». Ч. III. – 2009. – C. 479-481.

23. Плешакова Е.В., Матора Л.Ю., Турковская О.В. Применение иммунохимических методов для мониторинга штамма Dietzia maris, интродуцированного в нефтезагрязненную почву // Бюллетень МОИП. – 2009. – Т. 114, вып. 3. Приложение 1. Ч 2. Экология. Природные ресурсы. Рациональное природопользование. Охрана окружающей среды. – С. 233-239.

24. Плешакова Е.В., Варюшин А.В. Приёмы биотестирования для оценки токсичности нефтезагрязнённой почвы в процессе биоремедиации // 4-ая Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Экологические проблемы промышленных городов»: Сб. науч. тр. Ч. 1. – Саратов, 2009. – С. 50-52.

25. Беляков А.Ю., Плешакова Е.В., Любунь Е.В., Решетников М.В. Изменение активности ферментов в почве, загрязненной тяжелыми металлами, в процессе фиторемедиации // В мире научных открытий. – 2010. – № 4 (10), Ч. 5. – С. 34-36.

* 26. Плешакова Е.В., Кабанцева Е.Г., Черновол В.С. Активность дегидрогеназ в нефтезагрязненных почвах как инструмент мониторинга технологий биоремедиации // Известия Саратовского университета. Серия Химия. Биология.

Экология. – 2010. – Т. 10, Вып. 1. – С. 40-47.

27. Плешакова Е.В., Любунь Е.В., Варюшин А.В., Нежинская Е.Г. Оценка токсичности загрязнённой почвы после биоремедиации по дегидрогеназной активности бактерий // Первые Международные научно-практические Беккеровские чтения: Сб. науч. тр. Ч. 2. – Волгоград, 2010. – С. 302-303.

* 28. Плешакова Е.В. Разработка нового метода определения токсичности нефтезагрязнённой почвы // Вестник СГТУ. – 2010. – № 3 (46), Вып. 1. – С. 188 193.

Патенты:

* 29. Патент RU 2 288 044 C1, МПК В09С 1/08. Способ очистки грунта от нефтяных загрязнений / Дубровская Е.В., Турковская О.В., Плешакова Е.В. – 9 с.:

ил. Опубликовано 27.11.2006. Бюл. № 33.

* 30. Патент RU 2 301 258 C2, МПК С12N 1/26 В09С 1/10. Способ очистки грунта от нефтяных загрязнений / Дубровская Е.В., Турковская О.В., Плешакова Е.В. – 9 с.: ил. Опубликовано 20.06.2007. Бюл. № 17.

Учебно-методические пособия:

31. Общая биология: Материалы к гос. аттестации выпускников по спец. – «Биология» / Степанов С.А., Забалуев А.П., Плешакова Е.В. и др. – Саратов: Изд во Сарат. ун-та, 2006. – 232 с.

32. Руководство к практическим занятиям по экологической токсикологии: Учеб.

пособие для студ. биол. фак., обуч. по спец. 011600, 032400.00 «Биология», «Экология» / Сост. Е.В. Плешакова, С.А. Коннова, Е.В. Степанова, О.В. Слюзова;

Под ред. проф. В.В. Игнатова. – Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2006. – 56 с.

33. Экология. Материалы к государственной аттестации выпускников по специальности – «Экология» / Аникин В.В., Беляченко А.В., Плешакова Е.В. и др.

– Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2009. – 188 с.

Тезисы и материалы конференций:

34. Dubrovskaya E.V., Pleshakova E.V., Panchenko L.V., Muratova A.Yu. Structure of ABS- and Aph-degrading microbial communities // Abstr. Book of 9th European Congress on Biotechnology. – Brussels, 1999. – ECB9/2717.

35. Turkovskaya O., Panchenko L., Dubrovskaya E., Pleshakova E., Pozdnyakova N.

The application of active sludge in bioremediation processes // Abst. Book of Seventh International FZK/TNO Conference on Contaminated Soil. – Leipzig, Germany, 2000. – V. 2. – P. 1296.

36. Плешакова Е.В. Генетические аспекты деструкции сульфонола микробными консорциумами модельной установки // Мат. 2-го съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров. – Санкт-Петербург, 2000. – Т. 2. – С. 17.

37. Pleshakova E.V., Turkovskaya O.V., Pozdnyakova N.N. Method for stimulation the development of hydrocarbon-oxidizing microorganisms in soil // Abst. Book of 9th International Symposium on Microbial Ecology. – Amsterdam, 2001. – P. 23.056.

38. Турковская О.В., Панченко Л.В., Муратова А.Ю., Дубровская Е.В., Плешакова Е.В., Позднякова Н.Н. Использование активного ила в процессе биоремедиации // Экобиотехнология: борьба с нефтяным загрязнением окружающей среды: Тез. докл. конф. – Пущино, 2001. – С. 73-74.

39. Dubrovskaya E., Pleshakova E., Turkovskaya O. Study of dynamic for the development of microbial association during the biostimulation of oil-contaminated soil // Abstr. book of Xth International Сongress of Вacteriology and Applied Microbiology, The world of microbes. – Paris, 2002. – P. 203.

40. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В. Исследование динамики микробного сообщества нефтезагрязненной почвы в процессе биорекультивации // Стратегия взаимодействия микроорганизмов с окружающей средой: Мат. первой региональной конференции молодых ученых. – Саратов, 2002. – С. 6.

41. Плешакова Е.В. Использование ацидотолерантных микроорганизмов для восстановления нефтезагрязненных земель // Научная конференция молодых ученых, аспирантов и студентов, посвященная 115-летию со дня рождения академика Н.И. Вавилова: Тез. докл. – Саратов, 2002 – С. 103.

42. Турковская О.В., Дубровская Е.В., Муратова А.Ю., Панченко Л.В., Плешакова Е.В., Позднякова Н.Н. Возможности современных приемов биоремедиации окружающей среды // Биотехнология – состояние и перспективы развития: Мат. 1-го Международного конгресса. – Москва, 2002. – С. 290.

43. Dubrovskaya E.V., Pleshakova E.V., Turkovskaya O.V. Possibilities of use of a biostimulation method for cleaning up soil polluted by a high concentration of residual oil // Abstr. of International Symposium Biochemical interactions of microorganisms and plants with technogenic environmental pollutants. – Саратов, 2003. – С. 10-11.

44. Плешакова Е.В. Перспективы использования кислотоустойчивых микроорганизмов для восстановления нефтезагрязненных земель // Биотехнология:

состояние и перспективы развития: Тез. докл. 2-го Московского международного конгресса. – Москва, 2003. – Ч. 2. – С. 37-38.

45. Плешакова Е.В., Матора Л.Ю. Изучение эффективности биоремедиации нефтезагрязненной почвы при интродукции в нее штамма Rhodococcus maris АМ // Биотехнология – охране окружающей среды: Тез. докл. 2-ой международной научной конференции. – Москва, 2004. – С. 178.

46. Плешакова Е.В. Влияние интродукции штаммов-деструкторов на эффективность биоремедиации нефтезагрязненных почв Стратегия // взаимодействия микроорганизмов с окружающей средой: Мат. второй региональной конференции молодых ученых. – Саратов, 2004. – С. 49-50.

47. Плешакова Е.В., Матора Л.Ю., Турковская О.В. Перспективы использования нефтеокисляющего штамма Dietzia maris для биоремедиации загрязненной почвы // «Вавиловские чтения-2004»: Мат. Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 117-й годовщине со дня рождения академика Н.И. Вавилова. – Саратов, 2004. – С. 85-87.

48. Плешакова Е.В. Ремедиация загрязненной почвы с использованием нефтеокисляющего штамма Dietzia maris // Биотехнология: состояние и перспективы развития: Тез. докл. 3-го Московского международного конгресса. – Москва, 2005. – Ч. 2. – С. 26-27.

49. Плешакова Е.В., Матора Л.Ю., Никифоров М.В. Интродукция нефтеокисляющих микроорганизмов в загрязненную почву // Проблемы биодеструкции техногенных загрязнителей окружающей среды: Тез. докл.

международной научной конференции. – Саратов, 2005. – С. 87-88.

50. Панченко Л.В., Дубровская Е.В., Плешакова Е.В., Турковская О.В.

Рекультивация почвогрунтов, загрязненных нефтепродуктами в условиях промплощадок: опыт in situ и ex situ // Проблемы биодеструкции техногенных загрязнителей окружающей среды: Тез. докл. международной научной конференции. – Саратов, 2005. – С. 86-87.

51. Дубровская Е.В., Плешакова Е.В., Турковская О.В. Нефтеокисляющий потенциал почвенных микробных сообществ в процессах биоремедиации загрязненных почв и грунтов // Проблемы биодеструкции техногенных загрязнителей окружающей среды: Тез. докл. международной научной конференции. – Саратов, 2005. – С. 68.

52. Турковская О.В., Муратова А.Ю., Дубровская Е.В., Плешакова Е.В., Голубев С.Н., Бондаренкова А.Д. Деструктивный потенциал микроорганизмов и возможности его повышения // Микробное разнообразие: состояние, стратегия сохранения, биологический потенциал: Мат. 2-ой международной конференции. – Пермь-Казань-Пермь, 2005. – С. 101-102.

53. Плешакова Е.В. Изучение штамма-деструктора углеводородов нефти Dietzia maris АМ3 и возможности его использования для биоремедиации загрязненной почвы // Актуальные проблемы современной микробиологии: Тез.

докл. Всерос. Молодежной школы-конференции. – Москва, 2005. – С. 101-102.

54. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В., Турковская О.В. Использование нефтеокисляющих микроорганизмов для ремедиации загрязненных почв // Микробные биотехнологии: Тез. докл. Международной научной конференции. – Одесса, 2006. – С. 204.

55. Колесникова О.В., Плешакова Е.В. Исследование гидрофобности и деструктивной активности реизолятов нефтеокисляющего штамма Dietzia maris // Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой:

Мат. III межрегиональной конференции молодых ученых. – Саратов, 2006. – С. 50.

56. Плешакова Е.В., Дубровская Е.В., Турковская О.В. Интродукция нефтеокисляющих микроорганизмов в загрязненную почву: проблемы и перспективы // Микроорганизмы и биосфера: Мат. Международной научной конференции. – Москва, 2007. – С. 97-98.

57. Pleshakova E., Dubrovskaya E., Turkovskaya O. Dynamics of dehydrogenase and catalase activities in oil-polluted soil, as studied with two bioremediation techniques // Abst. Book of EGU General Assembly. – Vienna, 2008. – V. 10. – EGU2008-A-07857.

58. Плешакова Е.В., Кабанцева Е.Г., Черновол В.С. Использование дегидрогеназной активности нефтезагрязненных почв для мониторинга биоремедиации // Актуальные проблемы биоэкологии: Мат. Международной научно-практической конференции. – Москва, 2008. – С. 177-179.

59. Нежинская Е.Г., Финогеев Д., Варюшин А.В., Плешакова Е.В.

Биодиагностика нефтезагрязнённой почвы при её самоочищении и использовании технологии биостимуляции // Перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии: Тез. докл. XXII зимней молодежной научной школы. – Москва, 2010. – С. 109.

60. Нежинская Е.Г., Плешакова Е.В. Оценка эффективности приёмов биоремедиации нефтезагрязнённых почв по изменению активности дегидрогеназ // Биотехнология: экология крупных городов: Мат. Московской международной научно-практической конференции. – Москва, 2010. – С. 134-135.



Pages:     | 1 ||
 




 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.