авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Биотехнологические приемы оценки устойчивости сталей к коррозии, вызываемой бактериальной суль фатредукцией, и пути повышения коррозионной ус тойчивости нефтегазового оборудования

На правах рукописи

Зайцева Ольга Владимировна БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЕМЫ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ СТАЛЕЙ К КОРРОЗИИ, ВЫЗЫВАЕМОЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ СУЛЬ ФАТРЕДУКЦИЕЙ, И ПУТИ ПОВЫШЕНИЯ КОРРОЗИОННОЙ УС ТОЙЧИВОСТИ НЕФТЕГАЗОВОГО ОБОРУДОВАНИЯ 03.00.23 – биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Уфа – 2009

Работа выполнена на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Самарский государст венный университет»

Научный консультант: доктор биологических наук, профес сор Кленова Н.А.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профес сор Чемерис А.В.

доктор биологических наук, профес сор Еремец В.И.

Ведущая организация: Учреждение Российской академии на ук Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН

Защита состоится «19» июня 2009 г. в 14-00 часов на заседании Объединенного диссертационного совета ДМ 002.136.01 при Учреждении Российской академии наук Институте биологии Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, г. Уфа, проспект Октября, д. 69.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Россий ской академии наук Институте биологии Уфимского научного центра РАН и на официальном сайте: http://www.anrb.ru/inbio/sovet.html

Автореферат разослан «19» мая 2009 года

Ученый секретарь диссертацион- Уразгильдин Р.В.

ного совета, кандидат биологиче ских наук, доцент Актуальность проблемы. В настоящее время в связи с использованием вторичных методов добычи нефти, которые заключаются в заводнении нефтяных пластов поверхностными водами для поддержания пластового давления, наблю дается активизация жизнедеятельности сульфатвосстанавливающих бактерий (СВБ). СВБ являются уникальной физиологической группой, получающей энер гию в процессе сульфатного дыхания. В результате этого процесса выделяется се роводород, который вызывает интенсивную коррозию нефтегазового оборудова ния [NACE, 2004, Lee, 1993,Чугунов, 2002].

По оценкам специалистов нефтегазовой промышленности, биокоррозия является причиной от 20 до 80% аварийных случаев в нефтегазовом комплексе, которые приводят к экономическим потерям и ухудшению экологической об становки [Асфандияров, 1983].

Распространенный способ борьбы с биокоррозией с помощью бактери цидов оказывается малоэффективным, поскольку СВБ прочно адгезируются на поверхности металла и формируют биопленки, покрытые шламом и продукта ми коррозии [Сабирова, 1986].

Немногочисленные литературные данные [Geesey, 1996, Walsh, 1993] свидетельствуют о зависимости устойчивости стали к биокоррозии от ее хими ческого состава. Химический состав стали двояко влияет на стойкость стали по отношению к коррозии. Некоторые легирующие элементы существенно повы шают стойкость стали к бактериальной коррозии, в то время как другие эле менты, являясь потенциальными компонентами питания бактерий, могут уве личивать бактериальную коррозию.

На наш взгляд, одним из возможных путей снижения степени биокорро зии или ее предотвращения, может быть изменение химического состава труб ных и конструкционных сплавов. В этой связи, представляется перспективным для легирования трубных сплавов поиск химических элементов, ингибирую щих рост коррозионноопасных бактерий и одновременно предотвращающих их адсорбцию на поверхности металлов.

Цель и задачи исследования. Целью данного исследования было изу чение коррозионной активности микрофлоры нефтяных месторождений с це лью выбора тест-культуры для оценки устойчивости стали к биокоррозии и разработки биотехнологической концепции повышения устойчивости конст рукционных сплавов.

В рамках поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

1) изучить коррозионноопасную микрофлору некоторых нефтяных ме сторождений, выделить, охарактеризовать и отобрать накопительные культуры сульфатвосстанавливающих бактерий в качестве тест-объекта оценки коррози онной устойчивости стали;

2) исследовать адгезивные свойства клеток накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения;

3) изучить влияние ионов хрома и редкоземельных элементов в составе сред культивирования на рост, активность процесса сульфатредукции и дегид рогеназную активность накопительной культуры СВБ, выделенной из Приоб ского нефтяного месторождения;

4) изучить адсорбцию редкоземельных элементов церия и лантана на клетках накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения;

5) оценить влияние содержания хрома и некоторых редкоземельных ме таллов в стали на рост на поверхности стали биопленки накопительной культу ры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.

Научная новизна. Впервые выделена и охарактеризована коррозионно опасная микрофлора Приобского нефтяного месторождения.

Впервые изучено влияние разных концентраций ионов хрома в среде культивирования на рост накопительной культуры СВБ, выделенной из Приоб ского нефтяного месторождения.

Впервые исследовано влияние содержания хрома и редкоземельных эле ментов в стали на рост на поверхности стали и показатели метаболизма био пленки накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.

Впервые оценено влияние разных концентраций редкоземельных элементов в среде культивирования на рост и показатели метаболизма накопительной куль туры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.



Впервые изучена адсорбция редкоземельных элементов на клетках накопи тельной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения и исследована сила адгезии клеток данной культуры к поверхности стекла.

Теоретическая и практическая значимость работы. Проведен монито ринг нескольких нефтяных месторождений, в ходе которого получены данные по численности коррозионноопасной микрофлоры в исследованных месторож дениях.

Обоснован выбор накопительной культуры Приобского нефтяного место рождения в качестве биотеста для оценки коррозионной устойчивости сталей.

Выявлено, что по силе адгезии предложенная накопительная культура СВБ на несколько порядков превосходит музейные культуры.

Установлено, что введение редкоземельных элементов и хрома в трубный сплав повышает стойкость стали к биокоррозии наряду с улучшением механи ческих характеристик.

Основные положения, выносимые на защиту Хлорид хрома (III) оказывает небольшое стимулирующее действие, 1.

тогда как хромат (VI) и бихромат (VI) калия оказывают дозозависимое бактерио статическое действие на рост и показатели метаболизма накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.

Введение хрома в сталь наряду с улучшением механических 2.

свойств повышает стойкость к бактериальной коррозии, вызываемой накопи тельной культурой СВБ.

Установлена зависимость между составом стали и развитием на ее 3.

поверхности биопленки сульфатвосстанавливающих бактерий. Введение церия во включения наряду с микроструктурой стали изменяет адгезивные свойства СВБ по отношению к поверхности стали.

Количество клеток, содержание белка и дегидрогеназная актив 4.

ность СВБ в биопленке, а также скорость коррозии стали значительно ниже на сталях, модифицированных церием. Наибольшие показатели наблюдались на сталях с системой легирования Fe–Mn.

Установлено, что лишь довольно высокие концентрации редкозе 5.

мельных элементов церия и лантана (0,05% и выше) могут полностью ингиби ровать рост накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтя ного месторождения.

Установлено, что силы адгезии к поверхности субстратов музейной 6.

культуры СВБ и накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения, на несколько порядков превышают силы адгезии многих других культур бактерий, что может служить основой для объяснения высокой коррозионной опасности адгезированных форм сульфатвосстанавли вающих бактерий.

Апробация работы Материалы диссертации доложены и обсуждены на научно-практической конференции «Проблемы и методы обеспечения надежности и безопасности систем транспорта нефти, нефтепродуктов и газа» (Уфа, 2006), молодежной на учной конференции «Актуальные проблемы экологии Волжского бассейна» (Тольятти, 2007), на третьей международной научно-технической конференции «Экология и безопасность жизнедеятельности промышленно-транспортных комплексов ELPIT 2007» (Тольятти, 2007), XII международной конференции «Окружающая среда для нас и будущих поколений» (Самара, 2007), IV Всерос сийской научно-практической конференции «Нефтегазовые и химические тех нологии» (Самара, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, из ко торых 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введе ния, шести глав, заключения, выводов, списка использованных источников и приложений. Работа изложена на 142 страницах машинописного текста, содер жит 12 таблиц, 21 рисунок, 6 приложений. Библиографический список содер жит 178 наименований, в том числе 97 иностранных изданий.

ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объектом изучения послужили три физиологические группы коррозион ноопасных бактерий: тионовые бактерии, сульфатвосстанавливающие и угле водородокисляющие бактерии. Накопительные культуры данных трех групп бактерий были выделены на специфических элективных средах как из продук тов коррозионных отложений, так и из пластовых вод. На основе микробиоло гических посевов и значений индексов активности культура СВБ из Приобско го нефтяного месторождения была определена как наиболее активная и все дальнейшие исследования проводили в среде с данной культурой. Данная куль тура СВБ является накопительной, и в ходе биохимических и микробиологиче ских тестов был определен ее приблизительный состав и соответственно ему были подобраны следующие виды музейных культур бактерий: Desulfovibrio desulfuricans, Desulfotomaculum sp, Desulfobacter sp.

Также объектами исследования являлись стали с системой легирования Fe–Mn (09Г2С и 17Г1С), традиционно применяемые в нефтегазовой отрасли, и с системой легирования Fe–Cr (13ХФА), дополнительно модифицированные церием в трех различных концентрациях (0,0035, 0,0075 и 0,0199 %) и модифи цированные кальцием, а также стали 08ХМЧА и 15Х5М с повышенным содер жанием хрома. Размер образцов стали составлял 40104 мм.

Состав микробного сообщества пластовых вод анализировали путем по сева на жидкие питательные среды для выявления отдельных физиологических групп микроорганизмов. СВБ определяли на жидкой среде Постгейта С с лак татом кальция (3,5 г/л) в качестве донора электронов. Количество хлористого натрия варьировали в зависимости от состава пластовых вод от 10 до 60 г/л. За раженные 1 мл пластовых вод среды инкубировали в анаэростате АЭ-01. Ана эростат помещали в термостат при 30 С.

Тионовых бактерий (ТБ) определяли на жидкой минеральной среде с тио сульфатом. Флаконы инкубировали в термостате при 300С.

Углеводородокисляющих бактерий (УОБ) определяли на среде Раймонда с нефтью. Флаконы инкубировали в термостате при 300С.

Учет бактерий вели как по продуктам жизнедеятельности, характерным для той или иной физиологической группы, так и по микроскопии бактерий в световом микроскопе Karl Zeiss (Германия) при увеличении 1600 раз с иммер сией.

Для ориентировочной оценки количества бактерий в среде использовали индекс активности, который рассчитывали по формуле:

I= a где а – время (сутки) появления черного осадка, бактериальной мути или изменения цвета среды с момента посева пробы.

Для уточненной количественной оценки бактерий в среде использовали метод предельных разведений.

Для определения влияния различных соединений хрома на рост выде ленной культуры сульфатвосстанавливающих бактерий, в колбы со средой По стгейта С, зараженной накопительной культурой СВБ, добавляли растворы хлорида хрома (III), хромата (VI) калия и бихромата (VI) калия. Конечные кон центрации хлорида хрома (III) в среде составляли 0,205 и 0,410 мг/мл, хромата (VI) калия – 0,261 и 0,522 мг/мл, бихромата (VI) калия – 0,415 и 0,830 мг/мл.





Колбы инкубировали в анаэростате при 30 С в течение 7 суток. После инкуба ции определяли концентрации сероводорода в среде методом Пахмайера, белка в среде методом Лоури и дегидрогеназную активность спектрофотометрически по реакции образования формазана. Для удобства сравнения полученных ре зультатов определяли минимальную ингибирующую концентрацию (МИК – минимальная концентрация, при которой рост популяции снижается на 50%).

Определение влияния химического состава стали на скорость ее коррозии в среде СВБ проводили путем инкубации образцов стали во флаконах, зара женных культурами сульфатвосстанавливающих бактерий. Через две недели инкубации образцы стали с биопленками подвергали изучению биохимически ми методами. Для изучения плотности и характера заселения колониями био пленки использовали высокоразрешающую растровую электронную микроско пию. Производили подсчет среднего числа клеток на единицу площади образца, просматривая 25 случайных полей зрения.

Коррозионную активность СВБ определяли весовым методом (по потери массы стали).

Антибактериальные свойства соединений церия и лантана изучали путем инкубации накопительной культуры СВБ с данными соединениями в конечных концентрациях 0,0063 – 0,3%.

Измерение адсорбционных свойств клеточных стенок СВБ к редкозе мельным элементам проводили на энергодисперсионном рентгенофлуорес центном анализаторе БРА-18.

Определение сил адгезии накопительной и музейных культур СВБ к твердым поверхностям проводили по методу центрифугального отрыва [Звя гинцев, 1973].

При математической обработке результатов использовали критерий Стьюдента. Достоверными считали различия с уровнем значимости 95%.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. МОНИТОРИНГ НЕФТЯНЫХ МЕСТОРОЖДЕНИЙ И ХАРАКТЕРИ СТИКА НАКОПИТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ СУЛЬФАТВОССТАНАВЛИ ВАЮЩИХ БАКТЕРИЙ, ВЫДЕЛЕННОЙ ИЗ ПРОДУКТОВ КОРРОЗИИ ПРИОБСКОГО НЕФТЯНОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ Мониторинг нефтяных месторождений 1.1.

На предмет бактериального заражения нами были обследованы три неф тяных месторождения: Зимняя Ставка (Ставропольский край), Приобское (Нефтеюганск), Дмитровское (Самарская область).

Исследованные месторождения резко различаются по составу пластовых вод, но во всех трех месторождениях основным способом интенсификации добы чи нефти является заводнение, так как коллекторы низкопроницаемы.

По химическому составу пластовые воды Дмитровского месторождения относятся к хлоркальциевому типу, имеют минерализацию 244,62 г/л. Пласто вые воды Приобского нефтяного месторождения относятся к гидрокарбонатно натриевому типу, имеют минерализацию 24,3 г/л. Пластовые воды месторож дения Зимняя Ставка относятся к хлоркальциевому типу, имеют минерализа цию 85,5 г/л.

Нами были исследованы три физиологические группы микроорганизмов, которые мы выделяли как из пластовых вод каждого месторождения, так и из продуктов коррозии, собранных со стенок трубопроводов, вышедших из строя.

Это тионовые бактерии, углеводородокисляющие и сульфатвосстанавливаю щие, а также определялась численность сапрофитных бактерий, растущих на МПА (табл. 1).

Таблица Микробный состав продуктов коррозии разных месторождений (2005 г.) Название ме- Численность Группа тионо- Группа угле- Группа суль сторождения сапротрофных вых бактерий, водородо- фатвосста бактерий на кл/г продуктов кисляющих навливаю МПБ, коррозии бактерий, щих бакте кл/г продуктов кл/г продук- рий, кл/г коррозии тов коррозии продуктов коррозии 104 102 Дмитровское, Самарская об ласть 106 106 102 Зимняя Став ка, Ставро поль cкий край 106 106 102 Приобское, Нефтеюганск В результате проведенных экспериментов было выявлено, что Приобское месторождение и Зимняя Ставка содержат огромное количество коррозионно опасных бактерий, среди которых преобладают представители тионовых бакте рий и СВБ. Причем наибольшее количество СВБ сосредоточено в продуктах коррозионных отложений на стенках труб. Поэтому скорость коррозии трубо проводов на данных месторождениях очень высокая и трубы выходят из строя через 6-8 месяцев после начала эксплуатации. Большинство труб на данных ме сторождениях выплавлены из стали марок 09Г2С и 17Г1С, которые обладают низкой коррозионной стойкостью. Высокая минерализация вод Дмитровского месторождения предотвращает развитие коррозионноопасной микрофлоры в данном месторождении.

1.2. Характеристика накопительной культуры СВБ, выделенной из про дуктов коррозии Приобского нефтяного месторождения Для определения видового состава СВБ, присутствующих в коррозионных отложениях Приобского нефтяного месторождения, и изучения особенностей их метаболизма был произведен посев продуктов коррозии на среду Постгейта С с различными органическими субстратами: лактатом натрия (4 г/л), ацетатом натрия (1,5 г/л), бензоатом натрия (1 г/л), этанолом (5 мл/л). Производили учет численности СВБ и содержание сероводорода в конечных разведениях (табл. 2).

Также для более четкого разграничения родов данной накопительной культуры проводили окрашивание клеток по Граму и изучали их внешние морфологиче ские признаки (форму клетки и размеры).

Анализ роста накопительной культуры на разных субстратах показал, что данная культура включает в себя сульфидогенные бактерии различных метаболи ческих путей. Окраска клеток по Граму показала преобладание в культуре грам положительных бактерий, хотя небольшое количество грамотрицательных бакте рий присутствовало. Морфология изученных клеток сильно различалась. В куль туре присутствовали в основном прямые палочковидные клетки размером 0,5-1 х 1-4 мкм, реже встречались изогнутые палочки и кокковидные клетки. Также при сутствовали в большом количестве спорообразующие клетки. Таким образом, можно полагать, что преобладают бактерии рода Desulfotomaculum, так как этот род является грамположительным, клетки могут долго сохраняться в продуктах коррозии, находящихся на воздухе, за счет спорообразования, данный род исполь зует лактат, ацетат и этанол как доноры электронов. Рода Desulfovibrio и Desulfo bacter являются грамотрицательными. Desulfovibrio использует лактат и некото рые штаммы – этанол, Desulfobacter – ацетат. Ни один из этих двух родов не ис пользует бензоат. Бактерии данной культуры являются облигатными анаэробами, мезофилами, рост и образование сероводорода наблюдали в диапазоне температур от 150 до 450 С с оптимумом 30-320 С. Культура растет при концентрации NaCl от 1 до 5% в среде, оптимальной является среда, содержащая 1% NaCl. Культура хо рошо растет на среде без дрожжевого автолизата, но его внесение увеличивает продукцию сероводорода в среднем на 7%.

Таблица Численность СВБ в продуктах коррозионных отложений Приобского неф тяного месторождения, определяемая на средах с различными субстратами Субстрат Количество СВБ в пробе, Количество сероводо кл/мл рода в конечном раз ведении, мг/л Лактат 10 25,3±3, Ацетат 10 4,2±0, Бензоат 0 Этанол 10 3,2±0, Исходя из данных результатов, мы сделали заключение, что накопительная культура СВБ представляет собой консорциум, на 80% состоящий из бактерий рода Desulfotomaculum, в меньшем количестве присутствуют бактерии родов Desulfovibrio и Desulfobacter (примерно 20%).

Данная накопительная культура выделяет наибольшее количество серово дорода на среде с лактатом (25,3 мг/л в конечном разведении) (табл. 2).

Таким образом, данная накопительная культура СВБ лучше всего растет на среде с лактатом, поэтому все последующие эксперименты были осуществлены на среде Постгейта С с лактатом.

Рост выделенной культуры СВБ осуществляется согласно классической кривой роста бактериальных культур, лаг-фаза длится 12 часов, удельная ско рость роста в течение экспоненциальной фазы роста составляет в среднем 0, ч-1, время удвоения биомассы 27 часов. Таким образом, выделенная нами нако пительная культура СВБ развивается достаточно медленно по сравнению с культурами, выделенными другими исследователями [Лущаева И.В., 2007, Карначук О.В., 1995], но обладает высокой дегидрогеназной активностью и имеет достаточно продолжительную экспоненциальную фазу роста (четверо суток). Так как дегидрогеназная активность – важнейший показатель во многом определяющий скорость локальной коррозии стали, то данная культура СВБ является высоко коррозионноопасной.

2. ВЛИЯНИЕ ХРОМА В СРЕДЕ И В СТАЛИ НА РОСТ НАКОПИ ТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ СВБ, ВЫДЕЛЕННОЙ ИЗ ПРОДУКТОВ КОРРО ЗИОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ ПРИОБСКОГО НЕФТЯНОГО МЕСТОРОЖ ДЕНИЯ 2.1. Влияние содержания хрома в стали на рост биопленки накопитель ной культуры СВБ на поверхности стали Повышения коррозионной стойкости металлов можно достигнуть введе нием компонентов, способствующих образованию более совершенного экрани рующего защитного слоя продуктов коррозии на поверхности сплава. Приме ром такого способа легирования является повышение коррозионной стойкости углеродистой стали при легировании хромом.

Электронная микроскопия биопленок СВБ, образующихся на поверхно сти сталей, показала различия в количестве бактерий на единицу площади био пленки, а также изменение морфологии бактериальных клеток СВБ в зависимо сти от марки стали.

Нами было отмечено, что при увеличении концентрации хрома в стали количество бактериальных клеток на поверхности стали уменьшается. Также данные по количеству бактерий в биопленке подтверждаются данными по ко личеству белка в биопленке (табл. 3). Как известно, с одной стороны, хром яв ляется ингибитором роста бактерий, с другой стороны, хром образует защит ную оксидную пленку на поверхности металла. Поэтому при увеличении со держания хрома в стали до определенных пределов, можно снизить бактери альное прикрепление к поверхности стали. Биопленка на поверхности стали 15Х5М с высоким содержанием хрома (4,6%) располагается отдельными не большими кусочками. Также существенно меняется морфология клеток. Клетки становятся более тонкими и полупрозрачными, что свидетельствует о процес сах ингибирования их жизнедеятельности.

Таблица Зависимость количества СРБ в биопленке от концентрации хрома в стали Марка стали Количество бактерий в Количество белка в био поле зрения, 1200 мкм2 пленке, мкг/мл 09Г2С 124±8 193,2± 08ХМЧА 103±5* 176,4±9* 15Х5М 78±3* 134,5±6* Примечание: * - различия достоверны по отношению к контрольным образцам стали (09Г2С), р0, Однако гетерогенность сложно влияет на коррозионную стойкость спла вов. Если анодом является узкая зона границы зерна вследствие обеднения в этой узкой зоне твердого раствора легирующим элементом (хромом), то это приводит к увеличению коррозии границ зерен, то есть к межкристаллитной коррозии. Увеличение размеров зерна увеличивает межкристаллитную корро зию, так как уменьшается длина границ зерен.

Таким образом, введение хрома в сталь наряду с улучшением механиче ских свойств повышает стойкость к бактериальной коррозии, вызываемой на копительной культурой СВБ. Но возникает риск развития межкристаллитной коррозии.

2.2. Влияние соединений хрома в среде на рост накопительной культуры СВБ, выделенной из продуктов коррозионных отложений Приобского нефтя ного месторождения Многие стали, используемые для изготовления труб для нефтегазовой промышленности, содержат значительные количества хрома. В процессе экс плуатации труб часть хрома может переходить в растворенное состояние и при сутствовать в среде внутри трубопроводов. В связи с вышеизложенным, нам представляется важным изучение влияния небольших концентраций соедине ний хрома на развитие биопленки выделенной нами накопительной культуры СВБ.

В результате исследований было выявлено, что в концентрациях 0,205 и 0,410 мг/мл хлорид хрома (III) является стимулятором роста накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения. Так в средах с хлоридом хрома (III) в концентрациях 0,205 и 0,410 мг/мл содержание сероводорода было выше, чем в контроле, на 4,9 и 2,9% соответственно (рис. 1).

В среде с хроматом (VI) калия в концентрациях 0,261 и 0,522 мг/мл содержание сероводорода составляло 44 и 29% соответственно от контроля, а в среде с би хроматом калия (VI) в концентрациях 0,415 и 0,830 мг/мл – 7,5 и 5% от кон трольного варианта. Таким образом, бихромат и хромат калия замедляют рост СВБ, являясь в данных концентрациях токсичными для изучаемых бактерий соединениями.

Аналогичная тенденция прослеживалась при измерении содержания бел ка в среде с накопительной культурой СВБ (рис. 2). В средах с хлоридом хрома (III) в концентрациях 0,205 и 0,410 мг/мл содержание белка на 21,6 и 16,8 % со ответственно было выше, чем в контроле, а в средах с хроматом (VI) калия в концентрациях 0,261 и 0,522 мг/мл содержание белка составляет 49,0 и 38% от контрольного варианта, а в средах с бихроматом (VI) калия в концентрациях 0,415 и 0,830 мг/мл – 28,8 и 22% соответственно от контроля. Таким образом, содержание белка в среде с хлоридом хрома (III) было выше по сравнению с контролем, т.к. данное соединение выступает в качестве стимулятора роста СВБ, снижение же концентрации белка при введении соединений хрома (VI) объясняется ингибированием роста СВБ данными концентрациями хромата (VI) и бихромата (VI).

400 377.3 370. 359. Концентрация сероводорода, мг/л 158. 105. 50 26.9 18. Контроль Хлорид Хлорид Хромат Хромат Бихромат Бихромат хрома (III), хрома (III), калия (VI), калия (VI), калия (VI), калия (VI), 0,205 мг/мл 0,410 мг/мл 0,261 мг/мл 0,522 мг/мл 0,415 мг/мл 0,830 мг/мл Рис. 1. Влияние различных соединений хрома на активность процесса сульфат редукции накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения 0. 0. 0. Концентрация белка, мг/л 0. 0. 0. 0. 0. 0.2 0. 0. 0. 0. Контроль Хлорид Хлорид Хромат Хромат Бихромат Бихромат хрома (III), хрома (III), калия (VI), калия (VI), калия (VI), калия (VI), 0,205 мг/мл 0,410 мг/мл 0,261 мг/мл 0,522 мг/мл 0,415 мг/мл 0,830 мг/мл Рис. 2. Влияние различных соединений хрома на рост накопительной культуры СВБ (по белку), выделенной из Приобского нефтяного месторождения Общая дегидрогеназная активность в средах с хлоридом хрома (III) в концентрациях 0,205 и 0,410 мг/мл повысилась на 16,1 и 9,7 % соответственно по сравнению с контролем, в средах с хроматом (VI) калия в концентрациях 0,261 и 0,522 мг/мл составляет 54,8 и 34,8 % от контроля, а в средах с бихрома том (VI) калия в концентрациях 0,415 и 0,830 мг/мл составляет 16 и 12 % соот ветственно от контроля (рис. 3).

0. 0. 0.18 0. Концентрация формазана, мг/мл 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. Контроль Хлорид Хлорид Хромат Хромат Бихромат Бихромат хрома (III), хрома (III), калия (VI), калия (VI), калия (VI), калия (VI), 0,205 мг/мл 0,410 мг/мл 0,261 мг/мл 0,522 мг/мл 0,415 мг/мл 0,830 мг/мл Рис. 3. Влияние различных соединений хрома на общую дегидрогеназную ак тивность накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения Из полученных результатов можно сделать выводы, что хлорид хрома (III) оказывает небольшое стимулирующее действие на рост СВБ. Хромат (VI) и бихромат (VI) калия оказывают дозозависимое бактериостатическое действие на рост СВБ. Минимальная ингибирующая концентрация (концентрация, при которой рост популяции снижается на 50%) хромата калия для выделенной на копительной культуры СВБ – 191 мг/л (51 мг Cr+6/л), а бихромата калия – мг/л (42 мг Cr+6/л).

Можно предположить, что механизм нейтрализации действия соединений хрома сульфатредуцирующими бактериями – это редукция соединений хрома (VI) в соединения хрома (III) в ферментативных реакциях и в реакциях взаимо действия с продуктами метаболизма бактерий (например, сероводорода, кото рый является сильным восстановителем). В то же время нами было выявлено, что соединения хрома (III) являются даже стимуляторами роста для данной культуры и могут служить ей в качестве доноров электронов.

3. ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ РЕДКОЗЕМЕЛЬНЫХ МЕТАЛЛОВ В СТАЛИ И В СРЕДЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА РОСТ СУЛЬФАТВОС СТАНАВЛИВАЮЩИХ БАКТЕРИЙ 3.1 Влияние редкоземельных металлов в сталях на развитие биопленки СВБ на поверхности сталей Одним из традиционных способов борьбы с бактериями является приме нение бактерицидов, однако этот метод не всегда эффективен, так как участки локализации СВБ покрыты осадками продуктов коррозии (рис. 4).

Рис. 4. Внешний вид язвы с продуктами коррозии на внутренней стенке трубы Стали, модифицированные кальцием и церием, были исследованы нами на предмет стойкости к коррозии, вызываемой накопительной культурой СВБ.

Данный способ модификации стали позволяет уменьшить размер включений стали, что улучшает ее механические свойства.

Полученные в работе данные свидетельствуют о том, что стали с систе мой легирования Fe–Mn, традиционно применяемые в промышленности, явля ются нестойкими к биокоррозии. Концентрация бактериального белка и дегид рогеназная активность СВБ в биопленке являются максимальными на этих ста лях (табл. 4), что также подтверждается данными электронной микроскопии (рис. 5).

Введение в Fe–Cr стали церия в количестве 0,0035% привело к сниже нию количества клеток СВБ, адгезированных на поверхности, в 1,6 раза по сравнению со сталями 17Г1С. Что также подтверждается данными, получен ными по оценке количества белка. Дальнейшее увеличение массовой доли це рия до 0,0199% привело к значительному снижению числа клеток СВБ, а также количества белка в биопленке.

Результаты, полученные при испытании стали в среде с музейными культурами СВБ, были сравнены с результатами, полученными при испытани ях образцов стали в среде с накопительной культурой СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.

Сталь 13ХФА [Ce] = 0,0035 % Сталь 13ХФА [Ce] = 0,0199 % Сталь 13ХФА [Ce] = 0,0075 % Сталь 09Г2С Сталь 13ХФА, модифицированная кальцием Рис. 5. Вид биопленки из ассоциации музейных культур СВБ на образцах раз личных марок стали (электронная микроскопия, увеличение 10000) Таблица Зависимость концентрации белка и дегидрогеназной активности СВБ в биопленке от химического состава стали Марка стали Массовая Концентрация Дегидрогеназная ак доля церия бактериального тивность, мг форма в стали, % белка, мкг/мл зана/г белкасутки 13ХФА, модиф. цери- 0,0035 77,3±5,4 18,25±1, ем 0,0075 56,6±2,9 13,57±1, 0,0199 29,3±1,5 7,65±0, 13ХФА, модиф. каль- - 95,5±9,5 33,54±3, цием 09Г2С, легированная - 265,7±19,6 56,34±4, марганцем 17Г1С, легированная - 281,9±20,2 58,66±4, марганцем Мы оценивали влияние ассоциации музейных культур, состоящей из трех видов Desulfovibrio desulfuricans, Desulfotomaculum nigrificans, Desulfobacter sp. и накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторож дения, на скорость коррозии стали. Наибольшая скорость коррозии после двух недель экспозиции наблюдалась на сталях 09Г2С и 17Г1С. На стали 17Г1С кор розия достигала 0,98 г/м2сутки при воздействии на нее ассоциации музейных культур и 1,51 г/м2сутки при действии накопительной культуры СВБ, выделен ной из Приобского нефтяного месторождения (рис. 6). Таким образом, скорость коррозии стали 17Г1С под действием накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения в 1,5 раза выше по сравнению с дейст вием ассоциации музейных культур СВБ.

По данным, полученным нами в результате экспериментов, введение це рия во включения наряду с микроструктурой стали изменяет адгезивные свой ства СВБ по отношению к поверхности металла. С одной стороны, включения становятся достаточно мелкими для прикрепления к ним бактериальных кле ток, но, с другой стороны, церий, действуя на бактериальные клетки, изменяет их способность прикрепляться к поверхности металла.

3.2. Влияние церия и лантана в среде на рост накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения В результате проведенных нами исследований по влиянию церия и ланта на на рост накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения, было выявлено, что церий и лантан в концентрациях выше 0, % полностью подавляют рост бактерий (рис. 7). Возможным механизмом воз действия катионов редкоземельных металлов на бактериальные клетки является нейтрализация зарядов на поверхности клеток СВБ при введении катионов лан тана или церия в среду с СВБ, что ведет к гибели бактериальных клеток.

V, г / м2 ассоциация накопительная ассоциация накопительная ассоциация накопительная ассоциация накопительная ассоциация накопительная ассоциация накопительная 13ХФА с 13ХФА с 13ХФА с 13ХФА с 17Г1С 09Г2С 0,0035% Се 0,0075% Се 0,0199% Се кальцием 3 суток 7 суток 14 суток Рис. 6. Скорость коррозии стали различных марок (по потере веса) под дейст вием ассоциации музейных культур СВБ и накопительной культуры СВБ, вы деленной из Приобского нефтяного месторождения Концентрация сероводорода, мг/л конеч. конц. H2S в среде с Се конеч. конц. H2S в среде с La конеч. конц. H2S в среде без РЗМ 0,0063 0,025 0, Концентрация РЗМ в среде, % Рис. 7. Изменение концентрации сероводорода, выделяемого СВБ, в средах с разным содержанием церия, лантана и без РЗМ 4. АДСОРБЦИЯ РЕДКОЗЕМЕЛЬНЫХ МЕТАЛЛОВ НА КЛЕТКАХ НАКОПИТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ СВБ, ВЫДЕЛЕННОЙ ИЗ ПРИОБСКО ГО НЕФТЯНОГО МЕСТОРОЖДЕНИЯ И СИЛА АДГЕЗИИ СВБ К ТВЕРДОЙ ПОВЕРХНОСТИ 4.1. Адсорбция редкоземельных металлов на клетках накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения В своих экспериментах мы взяли растворы с высокими концентрациями лантана с целью определения максимальной концентрации лантана, которая может адсорбироваться на клеточных стенках бактерий. Через 1,5 часа инкуба ции накопительной культуры СВБ с растворами лантана было выявлено сниже ние концентрации лантана во всех растворах (табл. 5).

Полученные данные можно объяснить связыванием лантана фосфатными и карбоксильными группами бактериальных экзополимеров в первые часы ин кубации и удерживанием лантана в течение первых суток. Через двое суток происходит отдача катионов лантана в раствор, возможно, в связи с ослаблени ем электростатических взаимодействий катионов с группами биополимеров.

Максимум адсорбции лантана на поверхности бактериальных клеток составил от 0,11 до 0,16 г лантана на 1 г сырой биомассы. Содержание бактериального белка в растворах составило 40-70 мкг/мл.

Таблица Адсорбция лантана на клеточных стенках сульфатвосстанавливающих бактерий за разные промежутки времени Начальная кон- Концентрация Концентрация Концентрация центрация La в La в среде через La в среде через La в среде через среде, г/л 1,5 часа, сутки, 2 суток, г/л г/л г/л 2,001 ± 0,001 1,981 ± 0,003 * 1,992 ± 0,005 * 2,000 ± 0, 3,002 ± 0,001 2,973 ± 0,004 * 2,974 ± 0,003 * 3,001 ± 0, 4,001 ± 0,001 3,980 ± 0,005 * 3,982 ±0,003 * 4,000 ± 0, 5,002 ± 0,001 4,982 ± 0,003 * 4,983 ± 0,005 * 5,002 ± 0, 6,001 ± 0,001 5,972 ± 0,004 * 5,970 ± 0,004 * 5,990 ± 0, 7,003 ± 0,001 6,986 ± 0,004 * 6,986 ± 0,003 * 7,002 ± 0, Примечание: * – различия достоверны (Р 0,05) 4.2. Сила адгезии к твердой поверхности клеток накопительной культу ры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения Исходя из данных, полученных в вышеуказанных экспериментах, удалось установить, что накопительная культура СВБ, выделенная из Приобского неф тяного месторождения, обладает огромной способностью к адгезии к твердым поверхностям.

Учитывая тот факт, что основная часть накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения, представлена родом Desulfotomaculum sp, были проведены сравнительные эксперименты между на копительной культурой СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторож дения, и музейной Desulfotomaculum на предмет установления силы адгезии каждой из них к твердой поверхности.

Для удобства сравнения адгезии разных культур вводятся такие показате ли как сила адгезии (F50), при которой 50% клеток отрываются от поверхности и условный показатель адгезии Pa, равный отношению силы адгезии (F50) к весу клетки, необходимый для оценки адгезии клеток микроорганизмов разных по размеру. В результате проведенных экспериментов было установлено, что F для Desulfotomaculum sp равна 10,2х10-7 Дин/клетку (рис. 8), что в несколько раз выше по сравнению с другими бактериями. Например, данная величина в 7,6 раза выше по сравнению с аналогичными для Staphylococcus aureus и Bacte rium prodigiosum. Также для Desulfotomaculum sp Pa равна 3,4, что в 2,7 раза выше по сравнению с Bacterium prodigiosum и 1,3 раза выше, чем у Staphylococ cus aureus. Величину силы адгезии не удалось установить для накопительной культуры СВБ, так как при скоростях центрифугирования, примененных нами в ходе экспериментов, 50%-ный отрыв клеток не был достигнут, а, следователь но, сила адгезии данной накопительной культуры СВБ выше всех, данные ко торых представлены в литературе [Звягинцев, 1973].

Рис. 8. Интегральные кривые распределения клеток микроорганизмов по силе адгезии, характеризующей долю () оторвавшихся от поверхности клеток при данной силе отрыва (F) Прочное прикрепление клеток Desulfotomaculum sp, а в особенности, нако пительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения, может быть связано со своеобразием поверхности клеток данных культур.

Внеклеточные полимеры участвуют в связывании клеток в целые класте ры и в удержании клеток на поверхности. Агрегация микробных клеток ведет к градиенту электрохимической активности. Микробные кластеры становятся барьером для диффузии, и площадь под ними является катодом, в то время как площадь между кластерами играет роль анода. В результате скорость электро химической коррозии увеличивается.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В настоящее время биологическая коррозия занимает одно из ведущих мест среди причин поломки нефтегазовых трубопроводов. Биологическую кор розию можно приостановить, используя бактерициды, но этот метод не всегда эффективен, так как большинство коррозионноопасной микрофлоры обладает мощной способностью к адгезии на стенках трубопроводов и образует био пленку под продуктами коррозии.

Накопительная культура СВБ, выделенная из Приобского нефтяного ме сторождения, обладает уникальной особенностью – продолжительной экспо ненциальной фазой роста.

Авторами [Fang H.P. Herbert, 2002] установлено, что подавление активно сти СВБ в среде c ионами тяжелых металлов не ингибирует рост биопленок СВБ на поверхности стальных купонов во всех реакторах.

Исследованная нами накопительная культура СВБ, выделенная из Приоб ского нефтяного месторождения, является коррозионноопасной. На наш взгляд наиболее эффективным способом борьбы с коррозией стали, вызываемой СВБ, является модификация химического состава трубных сплавов.

Одним из наиболее распространенных способов модификации химического состава низкоуглеродистых сплавов является легирование хромом. Однако леги рование стали хромом приводит к увеличению размеров зерен, что в свою оче редь, ведет к увеличению скорости межкристаллитной коррозии. Поэтому данный способ модификации химического состава стали не всегда эффективен.

Наиболее эффективным способом модификации стали, при котором суль фидные включения стали становятся более мелкими (3-5 мкм), что улучшает как механическую, так и коррозионную стойкость стали, является модификация спла вов редкоземельными металлами. Данное заключение было сделано нами в ре зультате проведенных исследований с различными образцами стали.

Были исследованы традиционно применяемые стали (09Г2С и 17Г1С) и стали, выплавленные на Таганрогском металлургическом заводе, модифициро ванные церием или кальцием (13ХФА).

В ходе проведенных испытаний сталей на предмет их стойкости к бактери альной коррозии, вызываемой СВБ, было выявлено, что дегидрогеназная актив ность биопленок СВБ на сталях, модифицированных церием в концентрации 0,0199 % в 7,5 раз ниже по сравнению с аналогичными показателями для традици онно применяемых сталей 09Г2С и 17Г1С. Содержание белка в биопленках на сталях, модифицированных церием в концентрации 0,0199 %, было в 3,3 раза меньше по сравнению со сталями, модифицированными кальцием. Таким обра зом, несмотря на то, что модификация включений кальцием делает их тоже более мелкими и по размеру такими же как при модификации сталей редкоземельными металлами, природа кальция не дает ему такого преимущества, какое есть у ред коземельных металлов, и кальций используется бактериями в их процессах жиз недеятельности. Поэтому модификация сталей кальцием не дает желаемой стой кости данным сталям по отношению к коррозии, осуществляемой СВБ.

Также весьма важным является тот факт, что количество бактерий в средах с разными марками стали оставалось высоким и не зависело от присутствия стали той или иной марки. Это подтверждается данными по дегидрогеназной активно сти и количеству сероводорода в среде. Следовательно, химическая природа ста ли играет роль в процессах адгезии клеток СВБ на поверхность стали.

Также в проведенных нами экспериментах было установлено, что ско рость коррозии традиционно применяемых сталей 17Г1С и 09Г2С под дейст вием накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского нефтяного ме сторождения, в 1,5 раза выше по сравнению со скоростью коррозии данных сталей под влиянием ассоциации музейных культур СВБ. Такие же тенденции прослеживались при испытаниях всех остальных образцов стали. Это можно объяснить метаболическими взаимодействиями, которые сформированы у на копительной культуры СВБ и которых нет у ассоциации музейных культур.

В последующих экспериментах была подтверждена высокая сила адге зии к твердым поверхностям для выделенной культуры СВБ и для музейной культуры Desulfotomaculum sp, которая является предпосылкой для быстрого формирования биопленки СВБ на поверхности внутренних стенок трубопро водов. А это ведет к увеличению скорости электрохимической коррозии стали.

Таким образом, одним из самых надежных способов защиты нефтегазо вых трубопроводов от поражения коррозионноопасными СВБ является изме нение адгезивных свойств СВБ к поверхности стали, а это достигается моди фикацией химического состава сплавов, используемых для изготовления труб.

Накопительная культура СВБ, выделенная из Приобского нефтяного ме сторождения, характеризуется рядом свойств, которые в совокупности опреде ляют ее как высоко коррозионноопасный организм: сравнительно небольшой лаг-период, продолжительная экспоненциальная фаза роста, высокая дегидро геназная активность, способность к сульфатредукции и выделению сероводо рода как агрессивного инициатора коррозии, устойчивость к некоторым кон центрациям ионов тяжелых металлов (в частности, хрома), присутствующим в средах, и, наконец, огромная сила адгезии к самым различным субстратам.

Поэтому мы предлагаем использовать выделенную накопительную куль туру СВБ как тестовую культуру для определения устойчивости сталей, приме няемых в нефтегазовой промышленности, к биологической коррозии.

ВЫВОДЫ Накопительная культура СВБ, выделенная из Приобского нефтяно 1.

го месторождения, на 80% представлена спорообразующим видом Desulfoto maculum, остальные 20% составляют бактерии родов Desulfovibrio и Desulfobac ter. Основным источником углерода в среде для данной культуры является лак тат. Удельная скорость роста культуры составляет 0,026 час-1, время удвоения биомассы 26,65 часов.

Хлорид хрома (III) оказывает небольшое стимулирующее действие 2.

на рост СВБ. Хромат (VI) и бихромат (VI) калия оказывают дозозависимое бак териостатическое действие на рост СВБ. Минимальная ингибирующая концен трация хромата калия для выделенной накопительной культуры СВБ – 191 мг/л (51 мг Cr6+/л), а бихромата калия – 125 мг/л (42 мг Сr6+/л).

Введение хрома в сталь наряду с улучшением механических свойств 3.

повышает стойкость к бактериальной коррозии, вызываемой накопительной куль турой СВБ. Но возникает риск развития межкристаллитной коррозии.

Введение церия во включения наряду с микрострукторой стали из 4.

меняет адгезивные свойства СВБ по отношению к поверхности стали. Количе ство клеток, содержание белка и дегидрогеназная активность СВБ в биопленке значительно ниже на сталях, модифицированных церием. Наибольшие показа тели наблюдались на сталях с системой легирования Fe–Mn.

Коррозионная активность накопительной культуры СВБ, выделен 5.

ной из Приобского нефтяного месторождения, выше в 1,5-1,7 раз по сравнению с активностью ассоциации музейных культур. Наименьшая скорость коррозии (0,48 г/м2сутки) наблюдалась на сталях, модифицированных церием в концен трации 0,0199%. Скорость коррозии стали, модифицированной кальцием, а также сталей 17Г1С и 09Г2С равнялась 0,79 г/м2сутки для ассоциации и 1, г/м2сутки для накопительной культуры СВБ, выделенной из Приобского неф тяного месторождения.

Церий и лантан в концентрациях выше 0,05 % полностью подавля 6.

ют рост СВБ, выделенной из Приобского нефтяного месторождения.

Максимум адсорбции лантана на поверхности бактериальных кле 7.

ток составил от 0,11 до 0,16 г лантана на 1 г сырой биомассы при содержании бактериального белка в растворах – 40-70 мкг/мл. Максимум адсорбции ланта на бактериальными клетками СВБ достигается уже в первые часы и удержива ется в первые сутки, а затем происходит десорбция, так как клетки изменяют свои свойства.

Сила отрыва (F50) для Desulfotomaculum sp равна 10,2х10- 8.

Дин/клетку, что в несколько раз выше по сравнению с другими бактериями.

Величину силы адгезии не удалось установить для накопительной культуры СВБ, т.к. при скоростях центрифугирования, примененных нами в ходе экспе риментов, 50%-ный отрыв клеток не был достигнут, а, следовательно, сила ад гезии данной накопительной культуры СВБ выше многих других культур.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

Зайцева О.В. Разработка комплексной методики исследования био 1.

пленки, включающей биохимические и микробиологические методы исследова ния и высокоразрешающую растровую электронную микроскопию. /О.В. Зайцева, Н.А. Кленова, О.И. Бородина, А.В. Йоффе, Т.В. Тетюева // Вестник Самарского государственного университета. Естественнонаучная серия. Биология – 2006 №7(47) - С. 60-65.

Бородина О.И. Разработка методики исследования биопленки с 2.

применением растровой электронной микроскопии для оценки влияния леги рующих элементов на стойкость стали к биокоррозии /О.И. Бородина, О.В.

Зайцева, /Тезисы докладов научно-практической конференции «Проблемы и методы обеспечения надежности и безопасности систем транспорта нефти, нефтепродуктов и газа», 24 мая 2006 г. – Уфа: ТРАНСТЭК, 2006. С. 243-244.

Зайцева О.В. Адсорбция редкоземельных элементов на клеточных 3.

стенках накопительных культур сульфатвосстанавливающих бактерий, выде ленных из Приобского нефтяного месторождения. /О.В. Зайцева // Вестник Са марского государственного университета. Естественнонаучная серия. Биология – 2007 - №8(58) – С. 341-350.

Зайцева О.В. Влияние содержания хрома в стали на развитие био 4.

пленки сульфатредуцирующих бактерий. /О.В. Зайцева, Н.А. Кленова /Сборник трудов молодых ученых Первого международного экологического конгресса (Третьей международной научно-технической конференции) «Экология и безо пасность жизнедеятельности промышленно-транспортных комплексов» ELPIT 2007 – Том I – С. 206-209.

Зайцева О.В. Исследования коррозионноопасной микрофлоры неф 5.

тяных месторождений и влияние редкоземельных металлов на рост сульфатвос станавливающих бактерий. /О.В. Зайцева, Ю.А. Багдасарова //Известия Самар ского научного центра Российской академии наук. Специальный выпуск «Про блемы нефти и газа» - 2007 – С. 109-114.

Зайцева О.В. Микробиологические аспекты коррозионных разру 6.

шений магистральных трубопроводов /О.В. Зайцева /Труды XII Международ ной конференции «Окружающая среда для нас и будущих поколений», 3- сентября 2007 г. С. 58-59.

Зайцева О.В. Влияние химического состава стали на развитие био 7.

пленки сульфатредуцирующих бактерий /О.В. Зайцева, Н.А. Кленова, Е.В.

Ширнина, О.И. Титлова, А.В. Йоффе. /Экологический сборник. Труды молодых ученых Поволжья / под ред. проф. С.В. Саксонова. Тольятти: ИЭВБ РАН, 2007.

С. 45-50.

Зайцева О.В. Микробиологическая коррозия нефтегазовых трубо 8.

проводов и легирование стали для борьбы с ней /О.В. Зайцева, Н.А. Кленова // Нефтяное хозяйство. №4, 2008. С. 92-95.

Багдасарова Ю.А. Микробиологический мониторинг нефтяных ме 9.

сторождений /Ю.А. Багдасарова, О.В. Зайцева /Сборник научных трудов IV Всероссийской научно-практической конференции «Нефтегазовые и химиче ские технологии» - 2008 – С. 19, С. 65.



 

Похожие работы:





 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.