авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 ||

Механизмы регуляции катионных каналов в эукариотической клетке

-- [ Страница 2 ] --

Именно перестройки микрофиламентов, по-видимому, представляют «точку» конвергенции различных сигнальных путей, модулирующих активность каналов в клеточной мембране. Влияние холестерина и мембранных микродоменов на активацию каналов в нативных клетках может быть опосредовано реорганизацией актиновой сети.

На начальном этапе нашей работы само понятие «ионный канал» связывалось, прежде всего, с электрической возбудимостью, проведением нервного импульса, оставаясь, таким образом, предметом нейрофизиологии. Согласно исторически сложившейся классификации каналов, натриевыми, калиевыми и кальциевыми называют потенциал управляемые (voltage-gated) каналы возбудимых мембран. Эти названия, отражающие селективность каналов, остаются общепринятыми до сих пор, будучи дополненными номенклатурой на основе установленной аминокислотной последовательности и гомологии генов. Потенциал-управляемые натриевые каналы (Nav1.1-1.9) менее вариабельны по сравнению с калиевыми или кальциевыми каналами [1].

В наших исследованиях выявлена важная роль карбоксильных групп как компонентов подвижного воротного заряда – главного функционального элемента активационной системы натриевых каналов нервной клетки.

Как следует из наших данных и работ других авторов, в различных электроневозбудимых клетках экспрессируются катионные каналы, характеризующиеся натриевой селективностью и отсутствием потенциал-управляемой активации и инактивации. В отличие от известных потенциал-зависимых (voltage-gated) каналов нервных и мышечных клеток они были названы потенциал-независимыми (non voltage-gated) натриевыми каналами. Более точен англоязычный термин, поскольку уровень мембранного потенциала может оказывать некоторое модулирующее влияние на их активность. По биофизическим характеристикам исследуемые натриевые каналы близки к эпителиальным каналам (ENaC), за исключением чувствительности к амилориду и его производным. Анализ собственных и литературных данных позволяет полагать, что потенциал-независимые натриевые каналы, идентифицированные в клетках различной специализации, относятся к одному семейству катионных каналов DEG/ENaC, включающему также белки-дегенерины [15]. Фармакологическая чувствительность, в частности, блокирование амилоридом, по видимому, не может рассматриваться как необходимый и достаточный аргумент, доказывающий принадлежность каналов к этому семейству.

Полное описание функциональных свойств исследуемых каналов позволяет ставить вопрос об их молекулярной идентификации с применением методов избирательной инактивации генов.

Благодаря применению метода локальной фиксации потенциала (patch clamp) в сочетании с биохимическими подходами в наших исследованиях выяснены детальные механизмы взаимосвязи ионных каналов и цитоскелета. Обобщая полученные результаты, можно заключить, что актиновые структуры, ассоциированные с мембраной, играют центральную роль в регуляции катионных каналов в электроневозбудимых клетках. Активность потенциал-независимых натриевых каналов непосредственно контролируется процессами сборки-разборки примембранного цитоскелета. Роль динамики актина в активации и инактивации каналов демонстрируют и результаты опытов с использованием кэпирующего белка. Актиновые структуры, вероятно, могут рассматриваться как часть потенциал-независимого воротного (gating) механизма. Следуя традициям мембранологии, исследуемые натриевые каналы можно также назвать актин-регулируемыми или актин-управляемыми (actin-regulated или actin-gated channels).

На сегодняшний день остаются неясными вопросы, касающиеся участия микрофиламентов в функционировании эпителиальных натриевых каналов почки (ENaC), несмотря на известную молекулярную структуру и усилия исследователей. Прогрессу в этом направлении могло бы способствовать применение корректных экспериментальных подходов с использованием белков цитоскелета. Весьма вероятно, что реорганизация актина играет существенную роль в регуляции ENaC малыми G-белками, в частности Rho-белками [56]. При анализе действия фосфоинозитидов на активность ENaC также резонно было бы учитывать возможное участие актина и актин-связывающих белков [32].

Достаточно давно дискутируются проблемы предполагаемой механочувствительности каналов семейства DEG/ENaC. Показана механозависимая активация эпителиальных каналов почки при стимуляции клеточной поверхности протоком жидкости [57], что может вносить вклад в обеспечение ионного гомеостаза на уровне организма.

В этой связи в современной физиологии рассматриваются возможные механизмы «негормональной» регуляции каналов и вероятное участие цитоскелета в этих процессах.

Итоги нашей работы согласуются с представлениями о латеральной гетерогенности липидного бислоя [19,21,24]. На основании полученных нами данных можно судить о структурной и функциональной взаимосвязи ионных каналов, кортикальных микрофиламентов и липидных микродоменов в клеточной мембране. Натриевые каналы, активность которых сопряжена с динамикой актина, по-видимому, не ассоциированы с богатыми холестерином мембранными микродоменами (рафтами). Однако, как показывают наши результаты, возможное участие холестерина и рафтов в работе каналов и других сигнальных молекул может определяться не только их непосредственной ассоциацией с рафтами. Так, реорганизация актинового цитоскелета, инициированная нарушением целостности рафтов, может представлять промежуточное звено в регуляции функций ионных каналов и других мембранных белков. Данные, полученные на различных типах клеток, позволяют полагать, что перестройки микрофиламентов включают стадию декэпирования и поэтому зависят от соотношения глобулярного и фибриллярного актина. Специального внимания заслуживает тот факт, что снижение содержания холестерина в нативных клетках может существенным образом модулировать процессы клеточной регуляции, связанные с ионными каналами и динамикой цитоскелета.

ВЫВОДЫ 1. Активация и инактивация потенциал-зависимых натриевых (Nav) каналов нервной клетки управляется электрочувствительным воротным механизмом, в структуру которого входят отрицательно заряженные карбоксильные группы. В электроневозбудимых клетках активация и инактивация потенциал-независимых натриевых каналов контролируется процессами разборки-сборки примембранных микрофиламентов с участием актин-связывающих белков. Актиновые элементы цитоскелета, по-видимому, представляют важнейшую часть потенциал-независимого воротного механизма, управляющего открыванием и закрыванием каналов.

2. Активность потенциал-независимых натриевых каналов модулируется кэпирующими белками цитоскелета. Экзогенный кэпирующий белок CapZ повышает вероятность открытого состояния каналов за счет ограничения роста актиновой нити. Эти результаты, а также данные о влиянии различных видов актина на ионные токи доказывают, что именно сборка микрофиламентов на цитоплазматической стороне мембраны приводит к инактивации каналов.

3. В регуляции потенциал-независимых натриевых каналов принимают участие малые ГТФ-азы. При этом ключевым звеном в цепи передачи сигнала «G-белок–канал» являются перестройки цитоскелета, вероятно, включающие декэпирование микрофиламентов. Сопоставление эффектов негидролизуемого аналога ГТФ (GTPS), фаллоидина и различных видов актина подтверждает, что влияние малых G-белков на активность натриевых каналов в клетке опосредовано реорганизацией примембранных микрофиламентов.

4. В клетках с пониженным содержанием холестерина натриевые каналы также активируются в ответ на разборку F-актина. Добавление глобулярного (G) актина к цитоплазматической стороне мембраны приводит к быстрой инактивации каналов. Как в норме, так и после частичной экстракции холестерина ингибирующее действие G-актина на натриевые токи коррелировало с эффективностью сборки филаментов.

Таким образом, связь натриевых каналов с динамикой актина сохраняется в условиях деструкции богатых холестерином мембранных микродоменов (рафтов).

5. Активация натриевых каналов в нативных клетках может быть индуцирована входом ионов кальция (Са2+) в цитозоль из внеклеточной среды. В то же время уровень свободного ионизированного Са2+ не влияет непосредственно на свойства данных каналов. Действие Са2+ на активность каналов в клетке, по-видимому, обусловлено фрагментацией микрофиламентов при участии гельзолина, кальций-зависимого актин связывающего белка.

6. Натриевые каналы, активирующиеся при разборке микрофиламентов, не проявляют прямой механочувствительности. Локальное растяжение (stretch) мембраны вызывает активацию механочувствительных катионных каналов, типичных для клеток эукариот. Показана проницаемость механочувствительных каналов для внеклеточных двухвалентных катионов - кальция и магния - в физиологическом диапазоне концентраций (1–2 мМ).

7. Характеристики механочувствительных (стретч-активируемых) каналов зависят от состояния актиновой сети. Связь механочувствительных каналов с кортикальным цитоскелетом имеет сложный характер, затрагивая как ионофорные свойства, так и воротный механизм. Разборка примембранных микрофиламентов приводит к существенному снижению проводимости механочувствительных каналов и в некоторых случаях может повышать уровень их активности.

8. Частичная экстракция мембранного холестерина ингибирует механозависимую активацию каналов в клетках эритролейкемии человека К562. В клетках с пониженным содержанием холестерина наблюдается повышение порога активации и снижение вероятности открытого состояния каналов. Измерения механозависимых токов в различных условиях и комплементарные данные флуоресцентной микроскопии свидетельствуют, что подавление активности механочувствительных каналов опосредовано реорганизацией актина, инициированной, вероятно, нарушением целостности рафтов при снижении уровня мембранного холестерина.

9. Таким образом, ключевым звеном в регуляции различных типов катионных каналов в клетках эукариот являются динамические перестройки примембранного актинового цитоскелета, которые выступают в качестве универсального и необходимого посредника в реализации ассоциированных с мембраной процессов внутриклеточной передачи сигнала.

СПИСОК ОСНОВНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Negulyaev Yu.A., Vedernikova* E.A. 1985. Effect of pH on fast sodium channels in neurons of the rat dorsal root ganglion. Gen. Physiol. Biophys.

4: 359–365.

2. Негуляев Ю.А., Наумов А.П., Ведерникова Е.А. 1986. Влияние реагента Вудварда К на тетродотоксин-чувствительные натриевые каналы нейронов спинальных ганглиев крысы. Нейрофизиология. (6): 839–842.

3. Наумов А.П., Негуляев Ю.А., Ведерникова Е.А. 1987. Влияние водорастворимого карбодиимида на воротный механизм "быстрых" натриевых каналов мембраны сенсорных нейронов крысы.

Нейрофизиология. 19 (1): 46–53.

4. Негуляев Ю.А., Ведерникова Е.А. 1989. Блокирование ионами водорода одиночных натриевых каналов клеток нейробластомы.

Нейрофизиология. 21 (1): 101–105.

5. Negulyaev Yu.A., Vedernikova E.A. Savokhina G.A. 1990. Aconitine induced modification of single sodium channels in neuroblasoma cell membrane. Gen. Physiol. Biophys. 9: 167–176.

6. Савохина Г.А., Негуляев Ю.А., Ведерникова Е.А. 1991. Ca2+ чувствительные хлорные каналы малой проводимости клеток HeLa.

Биол. мембраны. 8 (9): 953–958.

7. Negulyaev Yu.A., Savokhina G.A., Vedernikova E.A. 1993. Calcium permeable channels in HeLa cells. Gen. Physiol. Biophys. 12: 19–25.

8. Negulyaev Yu.A., Vedernikova E.A. 1994. Sodium-selective channels in membranes of rat macrophages. J. Membr. Biol. 138: 37–45.

9. Negulyaev Y.A., Vedernikova E.A., Mozhayeva G.N. 1994. Several types of sodium-conducting channels in human carcinoma A-431 cells. Biochim.

Biophys. Acta. 1194: 171–175.

10. Ведерникова Е.А., Негуляев, Ю.А. 1995. Новый тип натрий селективных каналов в плазматической мембране невозбудимых клеток. Цитология. 37 (4): 364–365.

11. Негуляев Ю.А., Ведерникова Е.А., Максимов А.В. 1996.

Альдостерон повышает уровень активности Na-проводящих каналов в клетках хронической миелоидной лейкемии К562. ДАН РАН. 349 (5):

701–703.

12. Negulyaev Yu.A., Vedernikova E.A., Kinev A.V. Voronin A.P. 1996a.

Exogenous heat shock protein hsp70 activates potassium channels in U937 cells. Biochim. Biophys. Acta. 1282: 156–162.

13. Negulyaev Yu.A., Vedernikova E.A., Maximov A.V. 1996b. Disruption of actin filaments increases the activity of Na-conducting channels in human myeloid leukemia cells. Mol. Biol. Cell. 7: 1857– * с 2001г. – Морачевская.

14. Maximov A.V., Vedernikova E.A., Negulyaev Yu.A. 1997a. F-Actin network regulates the activity of Na+-selective channels in human myeloid leukemia cells. The role of plasma gelsolin and intracellular calcium.

Biophys. J. 72: 266a.

15. Vedernikova E.A., Maximov A.V., Negulyaev Yu.A. 1997. Two types of Na+ -selective channels in human leukemia cells. XXXIII Int. Congr.

Physiol. Sci. St. Petersburg. P002.43.

16. Maximov A. V., Vedernikova E. A., Hinssen H., Khaitlina S. Y.

Negulyaev Yu. A. 1997b. Ca-dependent regulation of Na+- selective channels via actin cytoskeleton modification in leukemia cells. FEBS Letters. 412: 94–96.

17. Ведерникова Е. А., Максимов А. В., Негуляев Ю. А. 1997.

Функциональные свойства и цитоскелет-зависимая регуляция натриевых каналов в плазматической мембране лейкозных клеток.

Цитология. 39 (12): 1142–1151.

18. Negulyaev Yu.A., Maximov A.V., Vedernikova E.A., Katina I.E. 1997.

Voltage-insensitive Na channels of different selectivity in human leukemic cells. Gen. Physiol. Biophys. 16: 163–173.

19. Ведерникова Е. А., Максимов А. В., Негуляев Ю.А. 1999.

Функциональная характеристика и молекулярная топология потенциал-независимых натриевых каналов. /Обзор/ Цитология. (8): 658–666.

20. Negulyaev Y.A., Khaitlina S.Y., Hinssen H., Shumilina E.V., Vedernikova E.A. 2000. Sodium channel activity in leukemia cells is directly controlled by actin polymerization. J. Biol. Chem. 275: 40933–40937.

21. Старущенко А.В., Мамин А.Г., Негуляев Ю.А., Ведерникова Е.А.

2000. Активация механочувствительных ионных каналов в плазматической мембране клеток К562. Цитология. 42 (7): 669–674.

22. Ведерникова Е.А., Хайтлина С.Ю., Негуляев Ю.А. 2000. Роль актинового цитоскелета в регуляции потенциалнезависимых натриевых каналов. «Цитоскелет и клеточная регуляция». Пущино.

8.

23. Staruschenko A.V., Negulyaev Y.A., Vedernikova E.A. 2000. Stretch activated ion channels in human leukemia cells. Neurophysiology. 32:

180–181.

24. Ведерникова Е.А., Старущенко А.В., Негуляев Ю.А. 2001.

Идентификация механо-активируемых каналов клеток лейкемии человека. Цитология. 43 (4): 326–327.

25. Shumilina E., Khaitlina S., Morachevskaya E., Negulyaev Y. 2001. Role of actin cytoskeleton dynamics in the regulation of non-voltage-gated sodium channels. Mol. Biol. Cell. 12: 467a.

26. Staruschenko A.V., Vedernikova E.A. 2002. Mechanosensitive cation channels in human leukemia cells: calcium permeation and blocking effect. J. Physiol. 541: 81–90.

27. Staruschenko A.V., Negulyaev Y.A., Morachevskaya E.A. 2002. Actin disassembly affects the conductive properties of mechanosensitive channels in leukemia cells. Biophys. J. 82: 270A.

28. Старущенко А.В., Негуляев Ю.А., Морачевская Е.А. 2002.

Ингибирующее и стимулирующее действие амилорида на потенциал независимые катионные каналы в клетках К562. Цитология. 44 (7):

675–680.

29. Shumilina E.V., Negulyaev Y..A., Morachevskaya E.A., Hinssen H., Khaitlina. S.Y. 2003a. Regulation of sodium channel activity by capping of actin filaments. Mol. Biol. Cell. 14: 1709–1716.

30. Shumilina E.V., Khaitlina S.Y., Morachevskaya E.A., Negulyaev Y.A.

2003. Non-hydrolyzable analog of GTP induces activity of Na+ channels via disassembly of cortical actin cytoskeleton. FEBS Lett. 547: 27–31.

31. Morachevskaya E.A., Shumilina E.V., Y.A. Negulyaev, S.Y. Khaitlina.

2004. Rearrangement of submembranous actin filaments mediates G protein-dependent regulation of Na channels in human leukaemia cells.

Biophys. J. 86: 231a.

32. Staruschenko A., Negulyaev Y.A., Morachevskaya E.A. 2005. Actin cytoskeleton disassembly affects conductive properties of stretch activated cation channels in leukaemia cells. Biochim. Biophys. Acta.

1669: 53–60.

33. Sudarikova A.V., Negulyaev Y.A., Morachevskaya E.A. 2006.

Cholesterol depletion affects mechanosensitive channel gating coupled with F-actin rearrangement. Proc. Physiol. Soc. 95–96.

34. Staruschenko A.V., Sudarikova A.V., Negulyaev Y.A., Morachevskaya E.A. 2006. Magnesium permeation through mechanosensitive channels:

single-current measurements.. Cell Res. 16: 723–730.

35. Morachevskaya E.A., Sudarikova A.V., Negulyaev Y.A. 2007.

Mechanosensitive channel activity and F-actin organization in cholesterol depleted human leukaemia cells. Cell Biol. Int. 31: 374–381.

36. Сударикова А.В., Чубинский-Надеждин В.И., Негуляев Ю.А., Морачевская Е.А. 2009. Функциональные свойства натриевых каналов в клетках К562 после экстракции холестерина. Цитология.

51 (8): 676–683.

37. Ефремова Т.Н., Чубинский-Надеждин В.И., Негуляев Ю.А., Хайтлина С.Ю., Морачевская Е.А. 2009. Влияние экстракции мембранного холестерина на характеристики механочувствительных каналов и актиновый цитоскелет. Сб. «Рецепция и внутриклеточная сигнализация». Пущино, 42–45.

СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Hille B. 2001. Ionic channels of excitable membranes. Sinauer Associates, Inc.

Sunderland, MA, USA. 814p. 2. Parekh A.B., Penner R. 1997. Physiol. Rev. 77: 901–30.

3. Vig M., Kinet J.P. 2007. Cell Calcium. 42: 157–62. 4. Clapham D.E. 2003. Nature. 426:

517–24. 5. Nilius B.et al. 2007. Physiol. Rev. 87: 165–217. 6. Armstrong C.M., Bezanilla F. 1973. Nature (Lond). 242: 459–61. 7. Almers W. 1978. Rev. Physiol. Biochem.

Pharmacol. 82: 96–190. 8. Mozhayeva G. N. et al., 1981. Biochim. Biophys. Acta. 643:

251–5. 9. Hamill O.P. et al. 1981. Pflgers Arch. 391: 85–100. 10. Sakmann B., Neher E.

1995. Single-Channel Recording. Plenum Press, New York. 700p. 11. Kunzelmann K.

2005. J. Membr. Biol. 205: 159–73. 12. Prevarskaya N. et al. 2007. Biochim. Biophys.

Acta. 1772: 937–46. 13. Benos D.J. et al. 1995. J. Membr. Biol. 143: 1–18. 14. Garty H., Palmer L.G. 1997. Physiol Rev. 77: 359–96. 15. Kellenberger S., Schild L. 2002. Physiol.

Rev. 82: 735–67. 16. Hamill O.P., Martinac B. 2001. Physiol. Rev. 81: 685–740. 17.

Sachs F., Morris C.E. 1998. Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. 132: 1–77. 18. Harder T., Simons K. 1999. Eur. J. Immunol. 29: 556–62. 19. Brown D. A., London E. 2000. J. Biol.

Chem. 275: 17221–4. 20. Nebl T. et al. 2002. J. Biol. Chem. 277: 43399–409. 21. Brown D. A. 2006. Am. J. Physiol. 21: 430–9. 22. Levitan I. et al. 2000. J. Gen. Physiol. 115:

405–16. 23. Shlyonsky V. G. et al. 2003. Am. J. Physiol. 284: 182–8. 24. Edidin M. 2003.

Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 32: 257–83. 25. Guharay F., Sachs F. 1984. J.

Physiol. 352: 685–701. 26. Remmert K. et al. 2000. Protein Expr. Purif. 18: 11–9. 27.

Hinssen et al. 1984. FEBS Lett. 166: 90–5. 28. Spudich J.A., Watt S. 1971. J. Biol. Chem.

246: 4866–71. 29. Zidovetzki R., Levitan I. 2007. Biochim. Biophys. Acta. 1768: 1311–24.

30. Armstrong C.M. 1981. Physiol. Rev. 61: 644–83. 31. Tenzic, A., Kurachi., Y. 1996. J.

Physiol. 492.2: 395–404. 32. Janmey P.A. 1998. Physiol. Rev. 78: 763–81. 33. Horber J.K. et al. 1995. Biophys J. 68: 1687–93. 34. Selden L.A. et al. 1983. Biochem. Biophys.

Res. Commun. 116: 478–85. 35. Turoverov K.K. et al. 1976. FEBS Lett. 62: 4–6.

36. Khaitlina S.Yu. et al. 1991. FEBS Lett. 279: 49–51. 37. Borisy G.G., Svitkina T.M.

2000. Cur. Opin. Cell Biol. 12: 104–12. 38. Berdiev B.K. et al. 1996. J. Biol. Chem. 271:

17704–10. 39. Erdahl, W.L. et al. 1994. Biophys.J. 66: 1678–93. 40. Barritt G.J., Gregory R.B. 1997. Cell Signal. 9: 207–18. 41. Gilman A. G. 1987. Annu. Rev. Biochem. 56: 615– 49. 42. Codina J. et al. 1987. Science. 236: 442–5. 43. Takai Y. et al. 2001. Physiol. Rev.

81: 153–208. 44. Schafer D.A. et al. 1996. J. Cell Biol. 135: 169–79. 45. O.P. Hamill, Jr.D.W. McBride. 1996. Pharmacol. Rev. 48: 231–52. 46. Lane J.W. et al. 1991. J.

Physiol. 441: 347–66. 47. Rusch A. et al. 1994. J. Physiol. 474: 75–86. 48. Yeh T.H. et al.

1998. Am. J. Physiol. 274: 566–76. 49. Ermakov Y.A. et al. 2001. Biophys. J. 80: 1851– 62. 50. Taglietti V., Toselli M. 1988. J. Physiol. 407: 311–28. 51. Yang X.C., Sachs F.

1989. Science. 243: 1068–71. 52. Small D.L., Morris C.E. 1995. J. Exp. Biol. 198: 1919– 29. 53. Maingret F. et al. 2002. Bioch. Biophis. Res. Comm. 292: 339-46. 54. Needham D., Nunn R.S. 1990. Biophys. J. 58: 997–1009. 55. Byfield F.J., et al. 2004. Biophys. J.

87: 3336–43. 56. Pochynyuk O. et al. 2007. Exp. Biol. Med. 232: 1258–65. 57. Fronius M., Clauss W.G. 2008. Eur. J. Physiol. 455: 775–785.



Pages:     | 1 ||
 




 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.