авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге право и левополушарных крыс при ингибировании no-синтазы в условиях нарушения мозгового кровообращения

На правах рукописи

Косенко Юлия Владимировна ИНТЕНСИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В МОЗГЕ ПРАВО И ЛЕВОПОЛУШАРНЫХ КРЫС ПРИ ИНГИБИРОВАНИИ NO-СИНТАЗЫ В УСЛОВИЯХ НАРУШЕНИЯ МОЗГОВОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ 03.00.04 – биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ростов-на-Дону 2009 2

Работа выполнена на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогического института Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южный федеральный университет»

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Менджерицкий Александр Маркович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник Федорова Татьяна Николаевна доктор биологических наук, профессор Погорелова Татьяна Николаевна

Ведущая организация: Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН (г. Москва)

Защита диссертации состоится «_» мая 2009 года в _ часов на засе дании диссертационного совета Д. 212.208.07 по биологическим наукам в Южном федеральном университете (344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Боль шая Садовая, 105/42, ЮФУ, ауд. 203).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Юж ный федеральный университет» по адресу: 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Пушкинская, 148.

Автореферат разослан «_» апреля 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук Колмакова Т.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Изменение интенсификации свободноради кальных процессов (СРП) возникает в организме в ответ на любое воздей ствие (Болдырев, 2001;

Лобов с соавт., 2002;

Olney, 1994;

Shivakumar et al., 1995;

Kondo et al., 1997;

Rao et al., 1999;

Adibhatia et al., 2003;

Warner et al., 2004 и др.). В условиях стресса могут развиваться энергетический дефицит (Биленко, 1989;

Лукьянова с соавт., 2007), дестабилизация клеточных мем бран и нарушение процессов рецепторного связывания (Гусев, Скворцова, 2001;

Скворцова, 2003), что приводит к гибели клеток по механизмам нек роза и апоптоза (Chopp, Li, 1996;

Morita-Fujimura et al., 2001;

Nozaki et al., 2001;

Kim et al., 2002;

Crack et al., 2006 и др.).

Одним из основных медиаторов, регулирующих развитие этих процес сов, является оксид азота, исследование которого стало возможным после открытия ферментных систем, ответственных за продукцию NO (Реутов, 1995). При этом использование ингибиторов NO-синтаз в различных моделях стресса способствует раскрытию вопроса о взаимосвязи антиоксидантного статуса и состояния системы оксида азота. Известно, что синтез индуцибель ной NO-синтазы в макрофагах и других клетках организма является основой неспецифической резистентности и адаптации к стрессорным воздействиям (Меерсон с соавт., 1994), а ингибирование деятельности индуцибельной NO синтазы снижает проявления окислительного стресса в условиях ишемиче ского повреждения мозга (Parmentier et al., 1999;

Rawal et al., 2004).

Одним из малоизученных препаратов, включающихся в регуляцию ак тивности синтаз оксида азота, является AR-R 17477. Опираясь на данные литературы, можно утверждать, что AR-R 17477 ингибирует как индуци бельную (Проскуряков с соавт., 2005), так и нейрональную изоформы NO синтазы (Harukuni et al., 1999;

O’Neil et al., 2000;

Fedorov et al., 2004;

Will mot et al., 2005). Важно, что данный препарат не ингибирует эндотелиаль ную NO-синтазу в силу ее важнейшей роли в поддержании сосудистого то нуса (Fedorov et al., 2004).

В настоящее время широко обсуждается проблема функционального состояния систем NO и антиоксидантов в контексте межполушарных взаи моотношений в условиях стресса. Исходя из представления о сопряженно сти поведенческого, нейрофизиологического и биохимического уровней системы функциональной межполушарной асимметрии (Клименко, 2004), наиболее адекватной моделью для изучения показателей свободноради кального окисления является нарушение мозгового кровообращения (НМК) у животных с разным латеральным профилем.

Актуальность проблемы ишемического повреждения мозга обусловле на тем, что, согласно статистическим данным, ежегодно в мире переносят инсульт около 6 млн. человек, а в России – более 450 тысяч (Яхно, Парфе нов, 2000). Сосудистые заболевания головного мозга являются одной из ведущих причин заболеваемости, смертности и инвалидизации в нашей стране (Верещагин, Суслина, 2003;

Гусев с соавт., 2003). При этом локали зация ишемического очага в мозге в значительной мере определяет степень функциональных и регуляторных нарушений в организме (Кадыков, 2003), вероятно, в том числе, в результате различий в антиоксидантном статусе структур мозга, а именно, латерализации нейрохимических систем (Фокин, Пономарева, 2004).

Цель работы: изучение влияния ингибитора NO-синтазы на развитие окислительного стресса и изменение энергетического обмена в мозге крыс с разным латеральным профилем при двусторонней окклюзии сонных артерий.

Задачи исследования:

1. Исследовать состояние свободнорадикальных процессов и энергетиче ского баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контра латерального направленности побежек и ротаций в лабиринте, и 24-ча совом лигировании сонной артерии со стороны полушария, ипсилате рального направленности побежек и ротаций.

2. Изучить состояние свободнорадикальных процессов и энергетического баланса в мозге крыс с разным латеральным профилем при 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального направленности побежек и ротаций, и 24-часовом лигировании сонной артерии со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций в лабиринте.

3. Выявить влияние ингибитора синтазы оксида азота (AR-R 17477) на свободнорадикальные процессы и энергетический баланс в мозге лож нооперированных крыс с разным латеральным профилем.

4. Исследовать влияние AR-R 17477 на процессы свободнорадикального окисления и энергетический баланс в структурах мозга крыс с разным латеральным профилем, находящихся в условиях двусторонней окклю зии сонных артерий.

Выявить критерии устойчивости организма к окклюзии сонных арте рий различной продолжительности у животных с разным латеральным профилем по изменению межполушарных взаимоотношений нейрохимиче ских систем.

Научная новизна результатов исследования. Впервые в модели дву сторонней окклюзии сонных артерий были установлены различия в проте кании свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в струк турах мозга крыс с разным латеральным профилем.

Впервые показано, что низкая устойчивость крыс с праволатеральным профилем к нарушению мозгового кровообращения формируется в резуль тате недостаточности антиоксидантной системы защиты и энергетического дефицита в структурах мозга.

Впервые показано, что ингибитор синтазы оксида азота (AR-R 17477) снижает интенсивность свободнорадикальных процессов, улучшает со стояние энергетического обмена в головном мозге крыс с разным латераль ным профилем при двусторонней окклюзии сонных артерий.

Научно-практическая значимость работы. Результаты исследования расширяют представления о нейрохимических основах формирования ре зистентности организма к условиям нарушения мозгового кровообращения в зависимости от латерального профиля животных и дополняют сущест вующие сведения о развитии окислительного стресса и изменении энерге тического обмена в мозге крыс при нарушении мозгового кровообращения.

Полученные данные о влиянии AR-R 17477 на показатели системы ан тиоксидантных ферментов и энергетического обмена открывают перспек тиву его практического применения в неврологической практике в качестве лекарственного препарата.

Основные результаты работы внедрены в учебный процесс в виде ме тодических разработок для проведения лекционных, практических и семи нарских занятий в процессе преподавания вузовских курсов «Физиология человека» и «Психофизиологические основы интеллектуальной деятельно сти» на кафедре анатомии и физиологии детей и подростков Педагогиче ского института Южного федерального университета.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В коре больших полушарий ложнооперированных животных с право латеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов и антиокси дантных ферментов выше, чем у крыс с леволатеральным профилем, что яв ляется неспецифическим фактором, определяющим устойчивость к стрессу животных с разным латеральным профилем. При стрессорном воздействии одинаковой интенсивности у животных с праволатеральным профилем про исходит более выраженное истощение антиоксидантной системы и накопле ние молочной кислоты в мозге, относительно крыс с леволатеральным про филем, что определяет больший процент выживаемости последних.

2. Снижение интенсификации свободнорадикальных процессов и уве личение асимметрии в распределении антиоксидантных систем в коре больших полушарий и в стволовых структурах мозга крыс в условиях вве дения AR-R 17477 перед двусторонней окклюзией сонных артерий способ ствуют возрастанию процента выживаемости животных. У крыс с правола теральным профилем введение AR-R 17477 перед 3-минутной окклюзией левой сонной артерии и 24-часовой окклюзией правой сонной артерии ока зывает наиболее значительное влияние на энергетический обмен, что со провождается повышением процента выживаемости животных в два раза в данной модели стресса.

3. Под влиянием введения ингибитора синтазы оксида азота у ложно оперированных животных с разным латеральным профилем происходит повышение межполушарных перестроек в функциональных системах анти оксидантных ферментов.

Апробация диссертационной работы. Материалы диссертации были представлены на IV Научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005), на Всероссийской конференции с международным участием «Струк турно-функциональные, нейрохимические и иммунохимические законо мерности асимметрии и пластичности мозга» (Москва, 2007), на II Научно практической конференции «Современные проблемы общей биологии и ес тествознания» (Ростов-на-Дону, 2007), на I Международной научно практической конференции «Новые технологии в экспериментальной био логии и медицине» (Ростов-на-Дону, 2007), на IV Научной конференции с международным участием «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (Паттайа, Таиланд, 2007), на IV Международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы меди цины и биологии» (Гоа, Индия, 2007), на II Научной конференции с меж дународным участием «Актуальные проблемы науки и образования» (Ва радеро, Куба, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ (из них 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ). Личный вклад ав тора в опубликованном материале составляет 70%, объем – 0,94 п.л.

Структура работы. Диссертация изложена на 165 страницах машино писного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания мате риалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения ре зультатов, выводов и библиографического списка, включающего 257 ис точников, из них 96 работ отечественных и 161 работа иностранных авто ров. Работа иллюстрирована 10 таблицами и 31 рисунком.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование проводили на 196 крысах-самцах линии Вистар в возрасте шести месяцев, массой 200–250 г. Животных содержали в условиях вивария при температуре 18 – 20С на стандартном рационе питания. В работе ис пользовали модель двусторонней окклюзии сонных артерий (ОСА) разной продолжительности (Pulsinelli et al., 1982) с целью развития у животных ишемических и реперфузионных повреждений структур мозга. Крыс обез движивали введением 1,2 мл 1%-го раствора тиопентала на 100 г массы тела животного. Все хирургические процедуры проводили стерильно. Контроль ной группой служила группа «ложнооперированных» животных, которым проводилась аналогичная операция, но без окклюзии сонных артерий.

Латеральный профиль (ЛП) животных определяли с использованием Y образного лабиринта (Ефимов с соавт., 1987). Регистрировали направление побежек в месте расхождения коридоров лабиринта и направленность ро таций в тупиках коридоров. Согласно данным литературы (Русинов, 1977;

Порошенко 1985) электрофизиологические корреляты моторно-ориентаци онной асимметрии в сопоставлении с электрофизиологическими признака ми искусственно сформированной и гестационной однополушарной доми нанты позволяют рассматривать полушарие, ипсилатеральное преимущест венной направленности побежек в лабиринте, как доминантное.

Экспериментальные животные с разным ЛП были разделены на шесть групп (табл. 1): 1-я группа – контрольные ложнооперированные крысы с праволатеральным (n = 8) и леволатеральным профилем (n = 8);

2-я груп па – животные с праволатеральным (n = 30) и леволатеральным профилем (n = 24), которым проводили перевязку сонной артерии (СА) со стороны полушария, контралатерального направленности побежек и ротаций (НПР) в лабиринте, на 3 минуты и окклюзию СА со стороны полушария, ипсила терального НПР, на 24 часа;

3-я группа – крысы с праволатеральным (n = 29) и леволатеральным профилем (n = 18), которым моделировали окк люзию СА со стороны полушария, ипсилатерального НПР, на 3 минуты и 24-часовую окклюзию СА со стороны полушария, контралатерального НПР;

4-я группа – крысы с праволатеральным (n = 8) и леволатеральным профилем (n = 8), которым за 1 час до ложной операции (л/о) внутрибрю шинно вводили AR-R 17477 в дозе 30 мг/кг веса;

5-я группа – крысы с праволатеральным (n = 17) и леволатеральным профилем (n = 16), которым Таблица Схема эксперимента Латеральный Группы животных профиль 1-я 2-я 3-я 4-я 5-я 6-я AR-R 17477+ AR-R 17477+ 3-минутная 3-минутная 3-минутная 3-минутная окклюзия окклюзия Левополу- окклюзия окклюзия ле правой СА+ левой СА+ шарные правой СА+ вой СА+ 24-часовая 24-часовая крысы 24-часовая 24-часовая окклюзия окклюзия окклюзия ле- окклюзия AR-R левой СА правой СА вой СА правой СА л/о 17477+ AR-R 17477+ AR-R 17477+ л/о 3-минутная 3-минутная 3-минутная 3-минутная окклюзия окклюзия Правополу- окклюзия ле- окклюзия левой СА+ правой СА+ шарные вой СА+ правой СА+ 24-часовая 24-часовая 24-часовая 24-часовая крысы окклюзия окклюзия окклюзия окклюзия ле правой СА левой СА правой СА вой СА внутрибрюшинно за 1 час до операции вводили AR-R 17477 (30 мг/кг), за тем проводили перевязку СА со стороны полушария, контралатерального НПР, на 3 минуты и окклюзию СА со стороны полушария, ипсилатераль ного НПР, на 24 часа;

6-я группа – крысы с праволатеральным (n = 19) и леволатеральным (n = 11) профилем, которым за 1 час до операции внутри брюшинно вводили AR-R 17477 (30 мг/кг) и проводили окклюзию СА со стороны полушария, ипсилатерального НПР, на 3 минуты и окклюзию СА со стороны полушария, контралатерального НПР, на 24 часа.

Через 24 часа после операции животных декапитировали в утренние часы. Мозг извлекали при минусовой температуре и выделяли правую и левую кору больших полушарий (КБП), правые и левые стволовые струк туры (СС). Результаты сравнивали с контрольной группой животных.

Во всех сериях эксперимента в гомогенатах отделов мозга определяли содержание ТБК-реактивных продуктов (ТБК-РП) (Арутюнян, 2000), ак тивность антиоксидантных (АО) ферментов: каталазы (Королюк с соавт., 1988), глутатионпероксидазы (ГПО) (Gunzler, Flohe, 1986), глутатионре дуктазы (ГР) (Beutler, 1975) и глутатион-S-трансферазы (ГТ) (Карпищенко, 1999), уровень восстановленного глутатиона (ВГ) (Ellman, 1959), тиоловых групп белков (Арутюнян, 2000). Интенсивность углеводного обмена в моз ге оценивали по содержанию основных метаболитов: глюкозы (с помощью набора реагентов фирмы «Ольвекс Диагностикум», Россия), пировиноград ной кислоты (определяли модифицированным методом Умбрайта [Камыш ников, 2000]) и молочной кислоты (МК) (определяли модифицированным методом Barker, Summerson [Меньшиков, 1987]).

Для оценки асимметрии в распределении нейрохимических систем в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга вычисляли коэф фициент асимметрии КА:

XR XL КА, XR XL где XR – значение данного показателя в правой коре больших полушарий (стволовых структурах), XL – значение данного показателя в левой коре больших полушарий (стволовых структурах).

Результаты были обработаны статистически и определены достоверно сти различий между группами по t-критерию Стьюдента и критерию Вил коксона с использованием программы Statistica 5.5.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на свободнорадикальные процессы в мозге у крыс с разным латеральным профилем. В результате проведенного исследования установлено, что у ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем уровень ТБК-РП в коре больших полушарий был ниже, чем у крыс с праволатеральным профилем. При введении AR-R 17477 перед л/о у крыс с праволатеральным профилем наблюдали достоверное снижение данного показателя в правых СС, а у крыс с леволатеральным профилем – в правых и левых стволовых структурах относительно контроля (табл. 2).

Таблица Содержание ТБК-РП, активность каталазы, глутатионпероксидазы, глутатион-S-трансферазы в мозге у ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем (M±m) Группы Правая КБП Левая КБП Правые СС Левые СС Содержание ТБК-РП (нмоль/г белка) Контроль, крысы с П 26,22±0,89 26,33±0,98 27,49±1,43 24,32±1, Введение AR-R 24,57±2,31 24,78±1,67 22,32±0,93* 22,67±2, перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 21,02±0,81# 20,09±0,72# 28,40±1,21 25,45±1, Введение AR-R 19,27±1,08 18,23±0,89 17,47±1,56* 20,33±1,21* перед л/о крысам с Л Активность каталазы (ммоль/мин. на 1 г белка) Контроль, крысы с П 4,25±0,16 5,38±0,20 4,04±0,15 2,06±0, Введение AR-R 7,21±0,26* 7,91±0,27* 6,64±0,22* 4,20±0,17* перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 4,04±0,14 3,63±0,13# 2,88±0,10# 3,32±0,11# Введение AR-R 5,03±0,19* 5,81±0,19* 4,55±0,17* 5,45±0,18* перед л/о крысам с Л Активность глутатионпероксидазы (мкмоль/мин. на 1 г белка) Контроль, крысы с П 46,29±1,40 60,99±1,74 80,15±2,76 77,26±2, Введение AR-R 23,72±0,79* 31,10±0,86* 32,42±1,26* 48,33±1,73* перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 40,13±1,54# 19,50±0,57# 43,27±1,24# 43,24±1,17# Введение AR-R 52,98±1,70* 22,74±0,65* 88,59±2,95* 56,70±1,72* перед л/о крысам с Л Активность глутатион-S-трансферазы (ммоль/мин. на 1 г белка) Контроль, крысы с П 5,52±0,19 6,11±0,19 4,12±0,08 4,19±0, Введение AR-R 4,26±0,13* 5,44±0,16 3,82±0,12 3,45±0,08* перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 12,87±0,31# 12,82±0,46# 10,25±0,29# 10,35±0,26# Введение AR-R 13,14±0,42 11,27±0,63 7,22±0,20* 7,94±0,27* перед л/о крысам с Л Примечание: П – праволатеральный профиль;

Л – леволатеральный профиль;

* – отличия достоверны относительно контроля;

# – отличия достоверны относительно кон трольных крыс с праволатеральным профилем.

Во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем наиболее значимое увеличение уровня ТБК-РП было зафиксировано в правом полушарии, а у животных с леволатеральным профилем наблюдали еще более выраженное накопление ТБК-РП в правой и левой КБП относительно контроля. В то же время в 3-й группе крыс с праволатеральным профилем наблюдали более значимое возрастание содержания ТБК-РП в КБП по сравнению с живот ными с леволатеральным профилем. Необходимо отметить, что у крыс 2-й и 3-й групп менее выраженное накопление ТБК-РП в мозге наблюдали в стволовых структурах при 3-минутной окклюзии СА (рис. 1).

300 250 * * * 250 * 200 * 150 * * * * * % * % * * 100 * 0 -50 - 1 2 3 4 1 2 3 2 группа правополушарные 3 группа правополушарные 5 группа правополушарные 6 группа правополушарные 2 группа левополушарные 3 группа левополушарные 5 группа левополушарные 6 группа левополушарные А Б 200 ** ** * 120 ** 150 ** * * * * 100 % ** * * % - 1 2 3 4 - * -50 1 2 3 * 3 группа правополушарные 2 группа правополушарные -100 * 6 группа правополушарные 5 группа правополушарные 3 группа левополушарные 2 группа левополушарные 6 группа левополушарные 5 группа левополушарные Г В Рис. 1. Изменение уровня ТБК-реактивных продуктов и каталазной активности в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием AR-R 17477 (в % к контролю): А, Б – содержание ТБК-реактивных продуктов;

В, Г – активность каталазы;

1 – правая КБП;

2 – левая КБП;

3 – правые СС;

4 – левые СС;

* – отличия достоверны по сравнению с контролем Введение AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий (ОСА) крысам с разным латеральным профилем способствовало уменьшению содержания ТБК-РП в мозге до уровня контроля, что свидетельствует о снижении ин тенсификации СРП в ответ на НМК.

Различия в содержании ТБК-РП в мозге у крыс с разным ЛП могут быть обусловлены разной функциональной активностью системы антиок сидантной (АО) защиты. Для подтверждения данного предположения далее провели изучение влияния ингибитора NO-синтазы на АО-активность моз га животных в разных моделях ОСА. Для этого в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга мы исследовали активность каталазы, фер ментов глутатионовой системы (глутатионпероксидазы, глутатион-S-тран сферазы и глутатионредуктазы), а также уровень неферментативных анти оксидантов (ВГ и белковых тиоловых групп).

В группе ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем ак тивность каталазы снижалась в левой КБП на 33% и в правых СС на 29%, но увеличивалась в левых СС на 61%, относительно ложнооперированных крыс с праволатеральным профилем. У крыс с разным ЛП при введении AR-R 17477 перед л/о наблюдали возрастание каталазной активности в ис следуемых структурах мозга относительно контроля (табл. 2).

В мозге крыс 2-й группы с праволатеральным профилем в коре больших полушарий наблюдалось снижение каталазной активности, а в стволовых структурах – увеличение, по сравнению с контролем. При введении AR-R 17477 крысам с праволатеральным профилем (5-я группа) обнаружено увели чение активности каталазы в левых стволовых структурах – p 0,01 (рис. 1).

У животных с леволатеральным профилем 2-й группы активность ката лазы достоверно увеличивалась только в левых СС на 57%, а при введении AR-R 17477 (5-я группа) – во всех структурах мозга (p 0,05), по сравне нию с контролем (рис. 1).

При ОСА наблюдали снижение активности ГПО в мозге крыс с право латеральным профилем (рис. 2). Следует отметить, что в КБП со стороны 24-часовой окклюзии СА отмечали также наибольшее снижение каталазной активности по сравнению с другими структурами мозга (рис. 1), что, веро ятно, является отражением значительной интенсификации здесь СРП. При введении же AR-R 17477 перед ОСА у крыс с правым ЛП наблюдали уве личение активности ГПО в левых (5-я группа), либо в правых стволовых структурах (6-я группа) относительно контроля.

В отличие от крыс с праволатеральным профилем, у крыс с леволате ральным профилем при ОСА активность ГПО увеличивалась во всех ис следуемых структурах мозга (за исключением правой КБП в 3-й группе).

Известно, что ГПО помимо восстановления гидроперекисей и утилизации Н2О2 проявляет и пероксинитритредуктазную активность, восстанавливая ONOO– до нитрит-аниона NO2– (Меньщикова с соавт., 2006). Возможно, именно повышенное содержание пероксинитрита у крыс с леволатераль ным профилем 2-й группы индуцирует наиболее выраженное повышение активности ГПО относительно контроля (рис. 2). Предварительное введе ние AR-R 17477 крысам с левым ЛП в данной модели ОСА способствовало снижению активности глутатионпероксидазы во всех исследуемых струк турах мозга. Возможно, это связано с уменьшением образования ONOO– в мозге, что в свою очередь обусловливает предотвращение реакций пере окисления и нитрования, в которые активно вступает пероксинитрит.

* * ** ** * ** 200 * ** % * * % - - **** ** * ** * - -200 ** ** ** * 1 2 3 4 1 2 3 3 группа правополушарные 2 группа правополушарные 6 группа правополушарные 5 группа правополушарные 3 группа левополушарные 2 группа левополушарные 6 группа левополушарные 5 группа левополушарные А Б 300 * ** 200 ** * 200 ** ** ** ** * % 100 % - ** ** * * -200 * - * * * 1 2 3 1 2 3 3 группа правополушарные 2 группа правополушарные 6 группа правополушарные 5 группа правополушарные 3 группа левополушарные 2 группа левополушарные 6 группа левополушарные 5 группа левополушарные В Г Рис. 2. Изменение активности антиоксидантных ферментов у крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием AR-R 17477 (в % к контролю): А, Б – активность глутатионпероксидазы;

В, Г – активность глутатион-S-трансферазы;

1 – правая КБП;

2 – левая КБП;

3 – правые СС;

4 – левые СС;

* – отличия достоверны по сравнению с контролем Кроме того, во 2-й группе крыс с леволатеральным профилем увеличение активности ГПО относительно контроля было значительно выше, чем в 3-й группе крыс с леволатеральным профилем. Вероятно, это может быть обу словлено более высокой активностью каталазы в мозге крыс с левым ЛП 3-й группы относительно 2-й группы крыс с леволатеральным профилем (рис. 1).

У ложнооперированных крыс с леволатеральным профилем выявлена более высокая активность глутатион-S-трансферазы в мозге, относительно ложнооперированных крыс с правым ЛП. При введении AR-R 17477 на блюдали достоверное снижение активности ГТ у животных с праволате ральным профилем в правой КБП и левых СС, а у крыс с леволатеральным профилем отмечали снижение активности ГТ в стволовых структурах, по сравнению с контролем (табл. 2).

В мозге крыс с праволатеральным профилем при двусторонней ОСА на фоне снижения ферментативной активности ГПО наблюдали увеличение активности ГТ, тогда как у крыс с леволатеральным профилем выявлена обратная зависимость – увеличение ГПО активности на фоне понижения активности ГТ (рис. 2).

Следует также отметить, что в стволовых структурах мозга при 3 минутной окклюзии СА у крыс с праволатеральным профилем 2-й и 3-й групп происходило наиболее значительное увеличение активности глута тион-S-трансферазы, а у животных с левым ЛП – наименьшее снижение ак тивности данного фермента.

Введение AR-R 17477 крысам с праволатеральным профилем при ОСА вы зывало, как правило, снижение активности глутатион-S-трансферазы, а у крыс с леволатеральным профилем – повышение ферментативной активности ГТ в ис следуемых структурах мозга, по сравнению со 2-й и 3-й группами (рис. 2).

Также было установлено, что у ложнооперированных крыс с леволате ральным профилем уровень ВГ достоверно ниже в коре больших полуша рий и правых стволовых структурах, относительно крыс с праволатераль ным профилем (табл. 3).

Таблица Уровень ВГ, активность глутатионредуктазы и содержание белковых тиоловых групп в мозге у ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем (M±m) Правая КБП Левая КБП Правые СС Левые СС Группы Содержание ВГ (мкмоль/г ткани) Контроль, крысы с П 0,90±0,03 0,82±0,03 1,74±0,06 0,85±0, Введение AR-R 0,36±0,01* 0,27±0,01* 1,30±0,05* 3,86±0,12* перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 0,63±0,02# 0,58±0,02# 0,67±0,02# 1,09±0, Введение AR-R 0,27±0,01* 0,52±0,02 0,84±0,03* 0,99±0, перед л/о крысам с Л Активность глутатионредуктазы (мкмоль/мин. на 1 г белка) Контроль, крысы с П 24,44±0,82 20,32±0,82 10,83±0,36 27,93±0, Введение AR-R 26,79±0,96 18,23±0,73 39,31±1,98* 28,51±0, перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 32,52±1,25# 23,91±0,89# 19,33±0,69# 30,96±0,89# Введение AR-R 33,23±1,23 22,17±0,78 46,13±1,67* 72,10±2,49* перед л/о крысам с Л Содержание белковых тиоловых групп (мкмоль/мг белка) Контроль, крысы с П 66,16±2,07 52,02±1,58 52,47±1,81 44,13±1, Введение AR-R 54,59±1,40* 71,32±1,93* 33,09±1,14* 47,38±1, перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 63,82±2,13 118,06±3,11# 47,89±1,71 73,75±2,31# Введение AR-R 69,60±2,18 63,69±1,93* 69,89±2,06* 46,77±1,23* перед л/о крысам с Л Примечание: сокращения как в табл. При ОСА в мозге у крыс с разным латеральным профилем наблюдали снижение уровня ВГ. Обратимая окислительная модификация SН-групп является неспецифической реакцией организма на экстремальное воздейст вие. Известно, что истощение содержания ВГ в мозге при нарушениях моз гового кровообращения не обусловлено потреблением ВГ в перекисных ре акциях с образованием окисленного глутатиона, а связано с первичным на рушением его синтеза из-за дефицита энергии или выходом ВГ во внекле точное пространство (Биленко, 1989). Под влиянием введения AR-R происходило увеличение уровня ВГ в исследуемых структурах мозга (за исключением коры больших полушарий у крыс с правым ЛП при ОСА).

Это является отражением положительного влияния препарата при НМК, так как восстановленный глутатион функционирует на трех линиях фер ментативной АО-защиты: восстановление Н2О2, гидроперекисей полинена сыщенных жирных кислот и обезвреживание вторичных метаболитов окислительной модификации (Кулинский, 1999).

В работе показано, что у ложнооперированных крыс с леволатераль ным профилем активность ГР достоверно выше в коре больших полушарий и стволовых структурах, относительно крыс с праволатеральным профи лем. При введении же ингибитора NO-синтазы перед л/о обнаружено зна чительное увеличение активности ГР у крыс с праволатеральным профилем в правых СС, а у крыс с леволатеральным профилем в правых и левых СС по сравнению с контролем (табл. 3).

У животных с праволатеральным профилем 2-й группы наблюдали бо лее значительное снижение активности глутатионредуктазы в мозге по сравнению с 3-й группой крыс с праволатеральным профилем, относитель но контроля. В стволовых структурах мозга со стороны 3-минутной окклю зии СА у крыс с правым ЛП 2-й и 3-й групп активность ГР была на уровне контроля, что, вероятно, способствовало увеличению ферментативной ак тивности глутатион-S-трансферазы в данных структурах мозга. При введе нии AR-R 17477 перед ОСА происходило увеличение активности ГР в моз ге крыс с праволатеральным профилем 5-й группы относительно 3-й груп пы животных с праволатеральным профилем.

Активность ГР в мозге животных с леволатеральным профилем 2-й группы была на уровне контроля, что, возможно, способствовало увеличе нию активности ГПО у этих крыс. Введение AR-R 17477 перед аналогич ной моделью ОСА у крыс с леволатеральным профилем привело к увели чению активности глутатионредуктазы в мозге относительно животных 2-й группы. Следует отметить, что введение AR-R 17477 в большей степени способствовало восстановлению функциональной активности ГР у крыс с разным ЛП при 3-минутной окклюзии СА со стороны полушария, контра латерального НПР, и 24-часовой окклюзии СА со стороны полушария, ип силатерального НПР, относительно другой модели стресса.

Таким образом, интенсификация процессов свободнорадикального окисления при ОСА не является обязательным фактором, приводящим к снижению активности АО-ферментов, и связь между этими двумя процес сами не всегда имеет односторонний причинно-следственный характер.

Так, существенное накопление ТБК-РП в головном мозге при НМК проис ходило на фоне повышения активности ГПО (у крыс с леволатеральным профилем), ГТ (у крыс с праволатеральным профилем). В то же время у крыс с разным латеральным профилем в некоторых структурах мозга уве личивалась активность каталазы.

В процессе изучения содержания белковых тиоловых групп было уста новлено, что у крыс с леволатеральным профилем 1-й группы уровень бел ковых SH-групп выше в левом полушарии и левых стволовых структурах по сравнению с крысами праволатерального профиля (табл. 3).

Наиболее значимое истощение белковых тиоловых групп на фоне сни жения концентрации ВГ наблюдали у крыс с праволатеральным профилем при 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА.

Тогда как у животных с левым ЛП при ОСА снижение уровня белковых SH-групп относительно контроля было обнаружено только в левом полу шарии и левых стволовых структурах.

При введении AR-R 17477 происходили неоднозначные изменения в содержании белковых тиоловых групп в мозге крыс при ОСА. Возможно, это связано с тем, что тиолы (тиоредоксин и тиоредоксинредуктазная сис тема) способствуют восстановлению каталитически активной структуры индуцибельной NO-синтазы (Ravi et al., 2004). Взаимосвязь тиоредоксина с NO-синтазой осуществляется как посредством прямого воздействия (за щищает NO-синтазу от feedback-инактивации NO), так и через различные факторы транскрипции. Следовательно, в условиях изменения интенсивно сти СРП восстановленный глутатион и белковые SH-группы могут изме нять свои свойства с антиоксидантного на прооксидантное.

Одной из наиболее значимых причин нарушения про- и антиоксидант ного равновесия является энергетический дефицит в клетках. Поэтому да лее представлены результаты изучения содержания глюкозы, пирувата и лактата в мозге у крыс с разным ЛП при ОСА.

Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на энергетический баланс в мозге у крыс с разным латеральным профи лем. Показатели содержания глюкозы, пирувата и лактата в мозге у ложно оперированных крыс с разным ЛП представлены в табл. 4.

При двусторонней ОСА у крыс с разным латеральным профилем наблю дали снижение уровня глюкозы в исследуемых структурах мозга (за исклю чением стволовых структур во 2-й группе крыс с правым ЛП). При введении ингибитора NO-синтазы перед ОСА уровень глюкозы в мозге увеличивался относительно крыс 2-й и 3-й групп (в стволовых структурах мозга крыс 2-й группы с праволатеральным профилем уровень глюкозы снижался).

Таблица Содержание глюкозы, пирувата и лактата в мозге у ложнооперированных крыс с разным латеральным профилем (M±m) Правая КБП Левая КБП Правые СС Левые СС Группы Содержание глюкозы (мкмоль/г влажной ткани) Контроль, крысы с П 2,33±0,09 2,24±0,06 2,03±0,08 2,06±0, Введение AR-R 2,18±0,08 2,76±0,07* 2,34±0,09* 2,29±0, перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 3,24±0,12# 2,28±0,08 2,54±0,10# 1,99±0, Введение AR-R 1,81±0,07* 1,70±0,07* 2,47±0,09 3,27±0,11* перед л/о крысам с Л Содержание пирувата (мкмоль/г влажной ткани) Контроль, крысы с П 1,27±0,04 1,15±0,04 1,77±0,05 2,10±0, Введение AR-R 1,89±0,05* 1,66±0,02* 3,08±0,09* 3,93±0,11* перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 1,84±0,05# 1,58±0,05# 2,28±0,06# 1,54±0,05# Введение AR-R 2,25±0,06* 1,66±0,05 2,16±0,06 2,46±0,07* перед л/о крысам с Л Содержание лактата (мкмоль/г влажной ткани) Контроль, крысы с П 0,64±0,02 0,63±0,02 0,88±0,03 0,90±0, Введение AR-R 0,69±0,02 0,69±0,02 0,77±0,05 0,85±0, перед л/о крысам с П Контроль, крысы с Л 1,06±0,03# 1,15±0,03# 1,80±0,06# 1,79±0,05# Введение AR-R 0,60±0,02* 0,70±0,02* 0,87±0,02* 1,41±0,04* перед л/о крысам с Л Примечание: сокращения как в табл. У крыс с праволатеральным профилем в условиях 3-минутной окклю зии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА происходило увеличение уровня пирувата в исследуемых структурах мозга относительно контроля (рис. 3). По данным В.С. Новикова с соавт. (1998), увеличение пирувата в мозге при окислительном стрессе свидетельствует о снижении его утилиза ции в процессе окислительного фосфорилирования. Введение AR-R перед аналогичной моделью ОСА способствовало снижению содержания пирувата в мозге, что, вероятно, связано с усилением процесса окислитель ного фосфорилирования.

В 3-й группе крыс с праволатеральным профилем наблюдали увеличе ние уровня пирувата в мозге относительно контроля (за исключением пра вого полушария), но накопление пирувата у данной группы животных было менее выраженным, чем во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем (рис. 3). При введении AR-R 17477 в 6-й группе крыс с праволатеральным профилем в КБП и правых СС содержание пирувата было увеличено отно сительно контроля.

300 60 * * 250 ** ** * * * * * * * * ** % 100 % - - - * ** * * -100 -60 * ** *** * * 1 2 3 4 1 2 3 2 группа правополушарные 3 группа правополушарные 5 группа правополушарные 6 группа правополушарные 2 группа левополушарные 3 группа левополушарные 5 группа левополушарные 6 группа левополушарные А Б 200 * * * ** * ** * 50 * 100 * ** % % 50 - -50 * -100 ** ** ** ** ** ** - 1 2 3 * * 1 2 3 3 группа правополушарные 2 группа правополушарные 6 группа правополушарные 5 группа правополушарные 3 группа левополушарные 2 группа левополушарные 5 группа левополушарные 6 группа левополушарные Г В Рис. 3. Изменение содержания пирувата и лактата в мозге у крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий под влиянием AR-R 17477 (в % к контролю):

А, Б – содержание пирувата;

В, Г – содержание лактата;

1 – правая КБП;

2 – левая КБП;

3 – правые СС;

4 – левые СС;

* – отличия достоверны по сравнению с контролем Снижение уровня пирувата относительно контроля в мозге обнаружено только у крыс с леволатеральным профилем в модели 3-минутной окклю зии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА, а также при введении AR R 17477 крысам 6-й группы с левым ЛП (p 0,05) (рис. 3).

Во 2-й группе крыс с праволатеральным профилем уровень молочной кислоты (МК) был выше уровня контроля во всех структурах мозга. При введении ингибитора NO-синтазы крысам с праволатеральным профилем 5-й группы накопление МК в мозге было менее выраженным, чем во 2-й группе крыс с правым ЛП. У крыс с леволатеральным профилем 2-й груп пы содержание лактата было ниже контрольных значений в левой коре больших полушарий и стволовых структурах. В 5-й группе животных с ле волатеральным профилем наблюдали достоверное снижение уровня лакта та во всех исследуемых структурах мозга относительно контроля (рис. 3).

В мозге крыс с праволатеральным профилем 3-й группы содержание МК было выше контроля (p 0,05), но не столь значимо, как во 2-й группе животных с правым ЛП. При введении AR-R 17477 крысам с праволате ральным профилем перед 3-минутной окклюзией правой СА и 24-часовым лигированием левой СА выявлено увеличение уровня МК в стволовых структурах (p 0,05) относительно контроля. У крыс с леволатеральным профилем 3-й и 6-й групп наблюдали снижение уровня МК в мозге, осо бенно в 6-й группе (рис. 3).

Увеличение уровня лактата в мозге крыс с праволатеральным профи лем в условиях ОСА свидетельствует о развитии метаболического ацидоза.

Известно, что закисление среды приводит к дестабилизации клеточных мембран, снижает функциональную активность нейронов, влияет на мета болические процессы, в частности, усиливает СРП, а в случаях значитель ных изменений рН вызывает гибель нейронов по механизму некроза. В хо де работы было установлено, что развитие ацидоза у крыс с правым ЛП со провождается снижением активности ГПО в мозге (рис. 2). Из данных, по лученных Е.М. Link (1985), известно, что ГПО проявляет максимальную активность при рН 7,5. Таким образом, увеличение уровня метаболическо го ацидоза, возможно, является одним из факторов, определяющих более низкую выживаемость особей с праволатеральным профилем в условиях ОСА, относительно животных с леволатеральным профилем. Кроме того, низкая резистентность животных с праволатеральным профилем является результатом высокого уровня метаболических процессов в контрольной группе крыс данного ЛП, что определяет истощение антиоксидантного зве на защиты при НМК.

При этом у крыс с праволатеральным профилем в условиях 3-минутной окклюзии левой СА и 24-часовой окклюзии правой СА изменение энерге тического баланса носит менее благоприятный характер, чем в других группах крыс при ОСА, вследствие значительного накопления пирувата и лактата в мозге. Под влиянием же введения AR-R 17477 происходит сни жение уровня пирувата и лактата в мозге при данной модели ОСА. Тогда как при введении AR-R 17477 крысам с правым ЛП 6-й группы изменения содержания пирувата и лактата в мозге не носили однонаправленный ха рактер.

Необходимо также отметить, что только в мозге крыс с левым ЛП 3-й группы происходило одновременное снижение уровня пирувата и лактата, что может быть связано с их быстрой утилизацией по пути окислительного фосфорилирования в качестве компенсаторного механизма при недостатке АТР. Известно, что в мозге активность пируватдегидрогеназного комплек са значительно выше, чем в других тканях. Кроме того, высокая активность лактатдегидрогеназы, легкая обратимость этой окислительно-восстанови тельной реакции, а также особенности внутриклеточной локализации лак татдегидрогеназы как в цитоплазме, так и в митохондриях позволяют наи более полно использовать пируват и лактат в дальнейших окислительных реакциях (Ашмарин, 1999). При введении AR-R 17477 перед ОСА крысам с леволатеральным профилем (5-я и 6-я группы) уровень пирувата и лактата в мозге снижался по сравнению, соответственно, со 2-й и 3-й группами (рис. 3).

Влияние введения AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий на коэффициенты асимметрии нейрохимических систем в мозге крыс с разным латеральным профилем. В настоящее время установлено суще ствование нейрохимической асимметрии на уровне не только коры боль ших полушарий, но и подкорковых структур, что подтверждают результа ты данного исследования. При изучении коэффициентов асимметрии ней рохимических систем экспериментальных животных было установлено, что при введении AR-R 17477 перед л/о в мозге крыс с разным ЛП повы шается латерализация исследованных биохимических показателей: у крыс с праволатеральным профилем в левом полушарии наблюдали преобладание активности ГТ, каталазы, содержание белковых SH-групп и глюкозы;

в ле вых стволовых структурах – активности ГП, содержания ВГ и белковых SH-групп. У крыс с правым ЛП 4-й группы в правом полушарии обнаруже но повышение содержания ВГ, пирувата и активности глутатионредуктазы;

в правых стволовых структурах – активности каталазы, ГТ и ГР относи тельно контроля.

У крыс с леволатеральным профилем 4-й группы наблюдали более вы раженные межполушарные перестройки изучаемых показателей по сравне нию с крысами праволатерального профиля 4-й группы, а именно: в правом полушарии происходило увеличение антиоксидантной емкости глутатион S-трансферазы, глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы, содержания белковых SH-групп, а также пирувата и глюкозы, а в правых стволовых структурах – активности глутатионпероксидазы и уровня белковых SH групп. В левом полушарии у крыс с леволатеральным профилем 4-й груп пы преобладала активность каталазы, содержание восстановленного глута тиона и лактата, а в левых стволовых структурах – активность глутатион редуктазы, восстановленного глутатиона, каталазы и содержание показате лей энергетического обмена.

В условиях стресса происходило нарушение межполушарных взаимо отношений нейрохимических систем: при НМК у крыс с разным латераль ным профилем снижалась антиоксидантная емкость в полушарии со сторо ны 24-часового лигирования СА. При этом неспецифическим механизмом действия предварительного введения препарата AR-R 17477 у крыс с пра волатеральным профилем в условиях ОСА является увеличение активности АО-систем в основном в левом полушарии. В то же время у крыс с левола теральным профилем 5-й группы наблюдали преобладание активности ГПО и ГТ в правом полушарии, а активности каталазы, ГР и содержание тиоловых групп белков – в левом. В 6-й группе крыс с леволатеральным профилем в правом полушарии преобладали активность глутатионредукта зы и уровень белковых SH-групп, а в левом полушарии – активность глута тионпероксидазы, каталазы, а также содержание ВГ.

Следует также отметить, что у крыс с разным ЛП 5-й и 6-й групп со держание ТБК-РП достоверно не изменялось между правой и левой корой больших полушарий, а также между правыми и левыми стволовыми струк турами (рис. 4). Тогда как в условиях ОСА симметризации антиоксидант ных систем и энергетического баланса между стволовыми структурами не происходило, но формировались новые латеральные взаимоотношения, что, вероятно, связано с повышением потребления энергетических ресур сов на фоне нитрозативного стресса. Это подтверждают данные литерату ры, согласно которым наибольшие энергетические траты приходятся на пе риод наиболее выраженной межполушарной асимметрии. Возможно, опре деленная часть энергии тратится на поддержание функциональной межпо лушарной асимметрии (Клименко, 2000), что может быть характерно и для стволовых структур.

0, 0,3 * # # коэффициент асимметрии 0, 0, коэффициент асимметрии 0, 0,2 * 0, 0, 0, 0, 0,05 * 1 2 3 4 5 0 -0, 1 2 3 4 5 -0,05 -0, # -0,1 -0, -0,2 # ПЛП ЛЛП ПЛП ЛЛП А Б Рис. 4. Изменение коэффициента асимметрии содержания ТБК-РП в коре больших полушарий и стволовых структурах мозга у крыс с разным латеральным профилем:

А – кора больших полушарий;

Б – стволовые структуры;

ПЛП – крысы с праволатераль ным профилем;

ЛЛП – крысы с леволатеральным профилем;

1–6 – экспериментальные группы;

* – отличия достоверны между правым и левым полушарием мозга;

# – отличия достоверны между правыми и левыми стволовыми структурами В то же время введение препарата перед ОСА сопровождалось возрас танием латерализации исследованных показателей между правыми и левы ми стволовыми структурами. Предположительно, это может быть связано с тем, что ингибирование NO-синтазы снижало энергозатраты, необходимые для функционирования клетки в ишемических условиях. В результате, при введении AR-R 17477, наблюдали значительное увеличение латеральных перестроек антиоксидантных систем и показателей энергетического балан са в стволовых структурах мозга.

ВЫВОДЫ 1. В модели 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полуша рия, контралатерального НПР, и 24-часовой окклюзии сонной артерии со стороны полушария, ипсилатерального НПР, показано, что выживаемость крыс с леволатеральным профилем в 2 раза превышает аналогичный пока затель для крыс с праволатеральным профилем. У крыс с праволатераль ным профилем ТБК-реактивные продукты накапливаются преимуществен но в правой коре больших полушарий и правых стволовых структурах моз га, а также наблюдается значительное снижение антиоксидантной системы защиты. Накопление пирувата и лактата в мозге крыс с праволатеральным профилем свидетельствует о менее благоприятном характере энергетиче ского баланса и развитии метаболического ацидоза, относительно крыс с леволатеральным профилем.

2. В модели 3-минутной окклюзии сонной артерии со стороны полуша рия, ипсилатерального НПР, и 24-часовой окклюзии сонной артерии со стороны полушария, контралатерального НПР, более высокий уровень вы живаемости наблюдается у крыс с леволатеральным профилем, относи тельно животных с праволатеральным профилем. В мозге крыс с леволате ральным профилем в данной модели стресса наблюдается увеличение фер ментативной активности каталазы и глутатионпероксидазы на фоне сниже ния уровня пирувата и лактата.

3. Под влиянием ингибитора синтазы оксида азота у животных с раз ным латеральным профилем формируется асимметрия в распределении по казателей системы антиоксидантной защиты в коре больших полушарий и стволовых структурах правой и левой половин мозга.

4. При введении ингибитора синтазы оксида азота перед окклюзией сонных артерий процент выживаемости животных с разным латеральным профилем возрастает за счет межполушарных перестроек нейрохимических систем в коре больших полушарий и в стволовых структурах мозга относи тельно групп стрессированных животных без введения препарата. При вве дении AR-R 17477 перед окклюзией сонных артерий в мозге животных с разным латеральным профилем уровень ТБК-реактивных продуктов сни жается до уровня контроля и повышается функциональная активность от дельных звеньев антиоксидантной системы защиты.

5. Критерием устойчивости организма к нарушению мозгового крово обращения является формирование асимметрии в распределении нейрохи мических систем на уровне не только коры больших полушарий, но и ство ловых структур.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Показатели свободнорадикальных процессов и энергетического обмена в мозге могут служить дополнительным тестом при оценке тяжести ише мического повреждения мозга больных в неврологической практике.

AR-R 17477 может быть рекомендован в качестве активного вещества препаратов, применяемых в неврологической практике для предотвращения развития ишемического инсульта после транзиторных ишемических атак.

Список работ, опубликованных по теме диссертации в журналах, рекомендованных ВАК РФ 1. Косенко, Ю.В. Влияние функциональной межполушарной асиммет рии и ингибитора индуцибельной NO-синтазы на показатели свободнора дикальных процессов в мозге у крыс при окклюзии сонных артерий / Ю.В.

Косенко, А.М. Менджерицкий, Г.В. Карантыш // Валеология. – 2007. – № 4.

– С. 20–25 (0,21 п.л., личн. вк. 60%).

2. Менджерицкий, А.М. Влияние ингибитора индуцибельной NO синтазы на показатели системы свободнорадикальных процессов у крыс с разным латеральным профилем в условиях нарушения мозгового кровооб ращения / А.М. Менджерицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Нейрохи мия. – 2008. – Т. 25, № 3. – С. 1–6 (0,21 п.л., личн. вк. 60%.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации 3. Карантыш, Г.В. Баланс нейромедиаторов и свободнорадикальные про цессы при ишемии/реперфузии / Г.В. Карантыш, А.М. Менджерицкий, И.Л.

Краснова, Ю.В. Косенко // Сборник трудов 4-й Научно-практической конфе ренции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека». – Смоленск, 2005. – С. 275–277 (0,08 п.л., личн. вк. 30%).

4. Косенко, Ю.В. Влияние AR-R 17477 на уровень МДА и активность глутатионпероксидазы и глутатион-S-трансферазы в гемисферах коры у крыс с разным латеральным профилем при хронической окклюзии сонных арте рий со стороны доминирующего полушария / Ю.В. Косенко, Г.В. Карантыш, А.М. Менджерицкий // Материалы Всероссийской конференции с междуна родным участием «Структурно-функциональные, нейрохимические и имму нохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга». – М.: ГУ НИИ неврологии РАМН, 2007. – С. 331–335 (0,21 п.л., личн. вк. 80%).

5. Менджерицкий, А.М. Влияние окклюзии сонных артерий на глута тионовую систему крыс с разным латеральным профилем / А.М. Мендже рицкий, Г.В. Карантыш, Ю.В. Косенко // Успехи современного естество знания. – 2007. – № 1. – С. 77–79 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

6. Косенко, Ю.В. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на ферментативную активность глутатионпероксидазы в мозге крыс с разным латеральным профилем при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, С.В.

Демьяненко, Г.В. Карантыш, А.М. Менджерицкий // Успехи современного естествознания. – 2007. – № 3. – С. 81–83 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

7. Косенко, Ю.В. Энергетический обмен в мозге крыс с разным лате ральным профилем при окклюзии сонных артерий / Ю.В. Косенко, Г.В. Ка рантыш, А.М. Менджерицкий // Фундаментальные исследования. – 2007. – № 4. – С. 72–74 (0,08 п.л., личн. вк. 80%).

8. Косенко, Ю.В. Влияние ингибитора индуцибельной NO-синтазы на энергетический метаболизм в мозге правополушарных крыс / Ю.В. Косен ко, Г.В. Карантыш, А.М. Менджерицкий // Сборник тезисов докладов 2-й Научно-практической конференции «Современные проблемы общей био логии и естествознания». – Ростов-н/Д.: Изд-во ПИ ЮФУ, 2007. – С. 33– (0,13 п.л., личн. вк. 80%).

9. Косенко, Ю.В. Функциональные перестройки нейрохимических систем у животных с разным латеральным профилем в условиях окклюзии сонных ар терий / Ю.В. Косенко // Материалы Первой Международной научно-практи ческой конференции «Новые технологии в экспериментальной биологии и ме дицине». – Ростов-н/Д.: ЦВВР, 2007. – С. 21–22 (0,08 п.л., личн. вк. 100%).

10. Mendzheritskii, A.M. Effect of an inhibitor of inducible NO-synthase on the indices of free radical-mediated process in rats with different lateralization profiles under conditions of impaired cerebral blood flow / A.M. Mendzheritskii, G.V. Karantysh, Yu.V. Kosenko // Neurochemical J. – 2008. – Vol. 25, № 3. – P. 209–214 (0,21 п.л., личн. вк. 60%).

Список сокращений АО – антиоксидант ВГ – восстановленный глутатион ГПО – глутатионпероксидаза ГР – глутатионредуктаза ГТ – глутатион-S-трансфераза КБП – кора больших полушарий л/о – ложная операция ЛП – латеральный профиль МК – молочная кислота НМК – нарушение мозгового кровообращения НПР – направленность пробежек и ротаций ОСА – окклюзия сонных артерий СА – сонная артерия СРП – свободнорадикальные процессы СС – стволовые структуры ТБК-РП – реактивные продукты, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой

 




 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.