авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ  БИБЛИОТЕКА

АВТОРЕФЕРАТЫ КАНДИДАТСКИХ, ДОКТОРСКИХ ДИССЕРТАЦИЙ

<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 ||

Ген протеинкиназы mak-v и ряд других генов с измененной экспрессией в опухолях и их использование в онкологии

-- [ Страница 2 ] --

4.3.3. Эффективность совместного действия аденовирусных препаратов и химиотерапевтических противоопухолвых средств Аденовирусные противоопухолевые препараты наиболее эффективны в комбинации с традиционными методами воздействия на опухоль, в частности, в комбинации с химиотерапией. Кроме того, инфекция клеток репликативно-дефектными аденовирусами вызывает активацию сигнальных путей, способствующих выживанию клеток, что может приводить к снижению эффективности действия противоопухолевых средств при их совместном применении с аденовирусными препаратами. Поэтому было проведено исследование эффективности совместного действия аденовирусных препаратов с этопозидом, таксолом, цисплатином и доксорубицином на модели 4-ех клеточных линий рака легкого (NCI-H1299, NCI-H358, Calu-I и A549). В результате проведенных экспериментов было установлено, что применение аденовирусных препаратов совместно с химиотерапевтическими средствами в суб-оптимальных концентрациях в целом приводит к усилению действия последних (Рис. 22). Исключение составили клетки линии NCI H358, в которых аденовирусные препараты не усиливали действия этопозида, и клетки линии Calu-I, в которых аденовирусные препараты ганцикловир-зависимо усиливали действия таксола в концентрации 5 нМ, но ослабляли его действие в концентрации 25 нМ.

Суммируя, аденовирусные препараты Ad-hTERT-HSV-tk и Ad-hTERT-CMV-HSV-tk сенсибилизируют клетки к действию исследованных химиотерапевтических агентов. При этом необходимо принимать во внимание возможность снижения эффективности действия таксола в высоких концентрациях при его применении совместно с аденовирусными препаратами, что, однако, зависит от типа клеток. Природа этого феномена остается неясной и может быть связана с интерференцией механизмов и кинетики гибели клеток, вызываемых HSV-tk в присутствии ганцикловира и таксола в высоких концентрациях.

5. Повышение эффективности противоопухолевых препаратов на основе рекомбинантных репликативно-дефектных аденовирусов 5.1. Селекция hTERT-позитивных опухолей Эффект от применения того или иного противоопухолевого средства может значительно различаться в зависимости от индивидуальных особенностей опухоли, что делает необходимым разработку диагностических средств и критериев для прогнозирования эффективности лечения. В случае с аденовирусными препаратами на основе промотора гена hTERT такими параметрами является чувствительность опухолевых клеток к заражению аденовирусом и активность промотора hTERT, направляющего экспрессию терапевтического гена, в опухолевых клетках. Так как не все опухоли являются hTERT-позитивными, это делает рациональным проведение селекции hTERT-позитивных опухолей для этого вида терапии. Для этого был создан диагностический набор «Тертоскрин», основанный на реакции обратной транскрипции с последующей ПЦР. Набор позволяет установить факт присутствия транскрипта hTERT в Рис. 23. Пример детекции транскрипта hTERT с использованием набота «Тертоскрин» в образце ткани опухоли легкого (А), но не в образце прилегающей к ней условно-нормальной (Б) ткани. «О+» - образец, «О-» - ОТ--контроль реакции обратной транскрипции;

«К-» - негативный контроль ПЦР;

«К+» положительный контроль ПЦР;

негативный контроль ПЦР;

М – стандарт молекулярных весов ДНК.

Рис. 24. Анализ продукции белка dEGFP в клетках линии NCI H1299, транзиторно трансфицированных плазмидами для продукции dEGFP с сигналом терминации транскрипции и полиаденилирования вируса SV40 (SV40), 3’-нетранслируемой областью транскрипта DNMT1 (DNMT1) или TOP2A (TOP2A). Для нормализации образцов использовали уровень продукции неомицин фосфотрансферазы II (NPT), кодируемой плазмидой для экспрессии dEGFP. Внизу приведены относительные количества dEGFP после нормализации на уровень продукции NPT.

ткани опухоли, тем самым позволяя предсказать активность фрагмента промотора в составе генно-терапевтической конструкции (Рис. 23). В настоящее время произведена опытная партия набора «Тертоскрин» для научных исследований с целью апробации его работоспособности и эффективности. Кроме того, присутствие транскрипта hTERT, устанавливаемое с помощью набора, как следует из опубликованных результатов исследований, может использоваться и для других целей, например для дифференциальной диагностики опухолей и в прогностических целях.

5.2. Повышение специфичности экспрессии в опухолевых клетках Обеспечение специфичности воздействия на опухолевые клетки является одной из основных проблем при разработке противоопухолевых средств. Одним из наиболее эффективных способов обеспечения специфичности генно-терапевтических препаратов, действие которых основано на экспрессии терапевтического трансгена, является использование опухоль-специфических промоторов. Однако, несмотря на достаточно высокую опухолевую специфичность, в неопухолевых клетках, тем не менее, может наблюдается низкий уровень транскрипционной активности таких промоторов. Эта активность может быть обусловлена как неспецифической активацией транскрипции с эктопических элементов векторной конструкции, так и присутствием транскрипционных факторов, достаточных для обеспечения транскрипции на невысоком уровне, что может Рис. 25. Сравнительный анализ влияния областей 3’-нетранслируемых транскриптов DNMT1 и TOP2A в составе экспрессионного модуля для продукции Приведены результаты HSV-tk.

определения жизнеспособности клеток трансфицированных NCI-H1299, плазмидой для экспрессии HSV-tk под контролем промотора hTERT с сигналом терминации транскрипции и полиаденилирования вируса SV40 (SV40), 3’-нетранслируемой областью транскрипта DNMT1 (DNMT1) или TOP2A (TOP2A), после обработки ганцикловиром (Ganc) в указанных концентрациях.

приводить к продукции в неопухолевых клетках терапевтического белка и иметь нежелательные последствия. Это делает необходимым дальнейшее повышение специфичности продукции терапевтического белка в опухолевых клетках.

Одним из способов контроля продукции белка в клетке является регуляция стабильности транскрипта. В частности, стабильность транскриптов ДНК метилтрансферазы 1, кодируемой геном DNMT1 и топоизомеразы II, кодируемой геном ТОР2А, контролируется за счет их селективной стабилизации в S- и в S- и G2/M-фазах клеточного цикла, то есть в процессе клеточного деления, и дестабилизацией транскриптов в других фазах клеточного цикла. Стабилизация транскриптов DNMT1 и ТОР2А в процессе клеточного деления опосредована их 3'-нетранслируемыми областями.

Более того, было продемонстрировано, что 3'-нетранслируемые области транскриптов DNMT1 и ТОР2А способны обеспечивать аналогичную стабилизацию гетерологичных кДНК в делящихся клетках. Этот факт является рациональной основой для использования фрагментов 3'-нетранслируемых областей транскриптов DNMT1 и ТОР2А в составе генных конструкций для селективной стабилизации трансгенных транскриптов в клетках опухоли, которые в ряде случаев характеризуются активной пролиферацией, и их дестабилизации в неделящихся клетках. Это позволит повысить специфичность продукции трансгенного белка в пролиферирующих клетках-мишенях. Однако, возникает вопрос об эффективности продукции белка в случае включения в экспрессионную конструкцию таких 3’-нетранслируемых областей, что может существенно повлиять на их эффективность из-за возможного снижения продукции терапевтического белка и нивелировать преимущества увеличения специфичности. Поэтому было проведено исследование изменения уровня продукции белка при замене одного из традиционно используемой последовательности терминации транскрипции и полиаденилирования вируса SV40 на 3’-нетранслируемые области транскриптов DNMT1 и TOP2A на примере дестабилизированного варианта белка EGFP (dEGFP). В результате анализа было установлено, что замена на 3’-нетранслируюмую область транскрипта DNMT1 не только не снижает уровень продукции белка, но и увеличивает его в ~1,6 раз, а при использовании 3’-нетранслируемой областью транскрипта TOP2A наблюдалось ~3-ех кратное снижение уровня продуцируемого белка dEGFP (Рис. 24). Таким образом, использование в составе экспрессионной конструкции 3’-нетранслируемой области транскрипта DNMT1 является оправданным для обеспечения большей специфичности экспрессии терапевтического белка в делящихся клетках. В случае с 3’-нетранслируемой областью транскрипта TOP2A ситуация менее однозначная и необходимо принимать во внимание 3-ех кратное снижение уровня продукции белка. Тем не менее, использование обоих 3’-нетранслируемых областей в экспрессионных модулях для продукции HSV-tk под контролем фрагмента промотора гена hTERT не оказывало существенного влияния на эффективность ганцикловир-зависимого ингибирования роста транзиторно трансфицированных клеток линии NCI-H1299 (Рис. 25). Это еще раз подтверждает эффективность экспрессионных модулей с 3’-нетранслируемыми областями транскриптов DNMT1 и TOP2A, селективно дестабилизирующих транскрипт трансгена в неделящихся клетках.

5.3. Использование LY294002 и LY303511 для увеличения продукции белков, кодируемых репликативно-дефектными аденовирусами Эффективность действия репликативно-дефектных аденовирусов непосредственно зависит от уровня продукции кодируемых ими терапевтических белков, и обеспечение достаточного для проявления терапевтического эффекта уровня экспрессии трансгена является одной из проблем, поскольку многие промоторы с высокой опухолевой специфичностью не способны обеспечить должного уровня продукции терапевтического белка. Однако известно, что ряд воздействий способны увеличить продукцию белков, кодируемых аденовирусами. К таким воздействиям относятся сопутствующее облучение, гипертермия, совместное применение с аденовирусными препаратами этопозида, топотекана и ингибиторов гистондеацетилаз. Сопутствующие аденовирусной терапии воздействия, приводящие к увеличению продукции кодируемого ими белка, вызывали улучшение эффективности проникновения аденовируса в клетки за счет увеличения экспрессии рецепторов для аденовируса на поверхности клеток (этопозид и ингибиторы гистондеацетилаз), благодаря влиянию на пост-трансдукционные процессы (топотекан) или действуя одновременно на пост-трансдукционном уровне и улучшая эффективность проникновения аденовируса (облучение). Комбинированное применение таких воздействий с рекомбинантными аденовирусами позволяет, с одной стороны, увеличить эффективность аденовирусной терапии, а с другой – сочетать в терапии два противоопухолевых средства, что повышает ее общую эффективность. Расширение спектра анти-неопластических средств, обладающих способностью увеличивать эффективность аденовирусной терапии, позволит проводить их подбор для сочетания с аденовирусной терапией с учетом чувствительности к ним опухолевых клеток, что позволит достичь максимального терапевтического эффекта. Это делает актуальным идентификацию новых анти-неопластических средств, которые, помимо своей противоопухолевой активности, способны увеличивать эффективность аденовирусной Рис. 26. Эффект ингибиторов PI3K/Akt/mTOR сигнального пути (А) и LY303511 (Б) на экспрессию GFP, кодируемого рекомбинантным репликативно-дефектным аденовирусом, в клетках линии NCI-H1299. Для контроля количеств нанесенных лизатов проводили детекцию -тубулина. «-» необработанные ингибиторами клетки.

терапии путем увеличения экспрессии кодируемого рекомбинантным аденовирусом белка.

сигнальный путь является перспективной мишенью в PI3K/Akt/mTOR противоопухолевой терапии, и его различные ингибиторы находятся в настоящее время в различных фазах клинических испытаний. Нами был проведен анализ влияния ингибиторов PI3K/Akt/mTOR сигнального пути на продукцию белков, кодируемых рекомбинантным аденовирусом, с целью выявления их способности, помимо собственной активности по отношению к компонентам PI3K/Akt/mTOR сигнального пути, повышать эффективность аденовирусных препаратов.

Обработка клеток линии NCI-H1299, зараженных рекомбинантным репликативно дефектным аденовирусом Ad-Tet-GFP, кодирующим зеленый флуоресцентный белок (GFP) под контролем тетрациклин-регулируемого промотора, ингибитором протеинкиназы GSK3 VIII, ингибитором протеинкиназы Akt X, ингибитором mTOR рапамицином или ингибиторами фосфоинозитид 3-киназ вортманнином и LY показало, что из исследованных веществ только обработка клеток LY294002 приводит к увеличению уровня продукции GFP (Рис. 26А). Поскольку другой ингибитор фосфоинозитид 3-киназ, вортманнин, не оказывал эффекта на уровень продукции GFP, это позволяет сделать вывод о том, что эффект LY294002 на экспрессию GFP, кодируемого рекомбинантным аденовирусом, не зависит от спсообности LY294002 ингибировать фосфоинозитид 3-киназы, а зависит от других активностей LY294002, которые включают в себя способность ингибировать протеинкиназы mTOR, ДНК-зависимой протеинкиназы (DNA-PK) и казеин киназу II. Отсутствие эффекта рапамицина позволяет сделать вывод о том, что комплекс mTORC1 также не является мишенью для LY294002 в этом процессе, однако не исключает, что эффект опосредован ингибированием комплекса mTORC2.

Поскольку эффект LY294002 не зависит от его способности ингибировать активность фосфоинозитид 3-киназ, было исследовано влияние его неактивного в отношении фосфоинозитид 3-киназ аналога, LY303511, на экспрессию GFP, кодируемого рекомбинантным аденовирусом. Как и LY294002, LY303511 обладал способностью Рис. 27. Ингибиторы топоизомераз и LY синергетично увеличивают продукцию белков, кодируемых рекомбинантными репликативно дефектными аденовирусами. Анализ продукции белка GFP в клетках линии NCI-H1299, зараженных аденовирусом Ad-Tet-GFP и обработанных указанными ингибиторами или их комбинациями. Для контроля количеств нанесенных лизатов проводили детекцию тубулина. «-» - необработанные ингибиторами клетки. LY3 – LY303511;

Eto – этопозид;

CPT – камптотецин.

увеличивать продукцию GFP в клетках линии NCI-H1299 (Рис. 26Б). Обнаруженная способность LY294002 и LY303511 увеличивать экспрессию рекомбинантных белков, кодируемых аденовирусом, не является узкоспецифичной для исследованной комбинации тетрациклин-регулируемого промотора и зеленого флуоресцентного белка, а также для клеток линии NCI-H1299. Аналогичный эффект наблюдается и для раннего промотора цитомегаловируса и промотора гена теломеразной обратной транкриптазы человека hTERT в комбинации с кДНК HSV-tk, а также при заражении клеток линий A549, NCI H358 и Calu-I. Далее был исследован эффект совместного применения ингибиторов топоизомераз, которые также увеличивают продукцию рекомбинантных белков, кодируемых аденовирусами, и LY303511 или LY294002. Совместная обработка клеток, инфицированных рекомбинантным аденовирусом, этопозидом или камптотецином с LY303511 обладала синергетическим эффектом и приводила к значительно большему увеличению продукции белка, кодируемого рекомбинантным аденовирусом, чем при обработке этими веществами по отдельности (Рис. 27). Аналогичные результаты были получены и для LY294002 в комбинации с этопозидом. Синергетичность действия ингибиторов топоизомераз и LY294002/LY303511 предполагает, что они действуют по различным механизмом, в то время как комбинация ингибиторов топоизомераз I и II (этопозила и камптотецина) не приводила к усилению эффекта (Рис. 27). Таким образом, установлена способность LY294002 и LY303511 по отдельности, а также совместно с ингибиторами топоизомераз, увеличивать продукцию рекомбинантных белков, кодируемых репликативно-дефектными аденовирусами. В частности, этот эффект наблюдался для противоопухолевого аденовирусного препарата Ad-hTERT-HSV-tk.

Существенно отметить, что LY294002 и LY303511 имеют предпосылки для использования в качестве противоопухолевых средств. Фармакологически приемлемая производная LY294002, SF1126 (Semaphore Pharmaceuticals Inc), является перспективным лекарственным средством и проходит в настоящее время клинические испытания как ингибитор PI3K. LY303511 и его производные рассматриваются как перспективные средства для ингибирования нежелательной пролиферации клеток, в том числе опухолевых, и в ближайшее время планируется проведение клинических испытаний LY303511 (EM101, Emiliem Inc.). Выявленный новый эффект LY294002 и LY303511 на экспрессию белков, кодируемых репликативно-дефектными аденовирусами, является основанием для возможного использования анти-неопластических фармацевтических средств на их основе совместно с аденовирусными противоопухолевыми препаратами с целью получения синергетического эффекта от их применения и увеличения эффективности лечения.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА Основные результаты работы получены лично автором, под его руководством или при его непосредственном участии в планировании и проведении экспериментов. Имена соавторов указаны в соответствующих публикациях.

БЛАГОДАРНОСТИ Исследования проводились при поддержке программ Президиума РАН «Фундаментальные науки – медицине» и «Молекулярная и клеточная биология», Российского Фонда Фундаментальных Исследований (инициативные научные проекты), федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники», INTAS Young Scientist Fellowship и The Wellcome Trust Short-Term Travel Grant.

Исследования протеинкиназы MAK-V проводились при участии сотрудников лаборатории молекулярной генетики рака (зав. лаб. С.Л. Киселев) и молекулярной онкогенетики (зав. лаб. И.В. Коробко) ИБГ РАН в соответствии с соавторством опубликованных результатов исследований, а также при поддержке и участии В.Л.

Бухмана и Н.Н. Нинкиной (University of Edinburgh/Cardiff University, Великобритания).

Анализ продукции протеинкиназы MAK-V в опухолях молочной железы проводился совместно с РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН (Н.Т. Райхлин) и МНИОИ им. П.А. Герцена (Г.А. Франк, Л.Э. Завалишина). Работы по анализу дифференциальной экспрессии генов в опухолях легкого и созданию аденовирусных препаратов проводились совместно с ИМГ РАН (Е.Д. Свердлов), ИБХ РАН им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова (Е.Д.

Свердлов, Т.В. Виноградова, Е.П. Копанцев) (образцы для анализа), ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф.Гамалеи (Б.С. Народицкий, Д.Ю. Логунов, М.М. Шмаров) (получение аденовирусов, аденовирус для продукции GFP), МНИОИ им.

П.А. Герцена (Г.А. Франк, Л.Э. Завалишина) (иммуногистохимический анализ с анти антителами). Исследования по использованию как мишени для Pdcd4 Pdcd противоопухолевой терапии и по выявлению и характеризации эффекта на продукцию белков, кодируемых рекомбинантными LY294002/LY аденовирусами, проводились при участии Е.В. Коробко.

Автор выражает благодарность всем принявшим участие и помогавшим в проведении исследований, обсуждении их результатов и предоставившим уникальные реагенты для их проведения.

ВЫВОДЫ 1. Протеинкиназа MAK-V участвует в регуляции эндоцитоза и является ассоциированным с центросомами клеток белком. Увеличенная экспрессия протеинкиназы MAK-V может способствовать повышению жизнеспособности клеток. Протеинкиназа MAK-V не является необходимой для нормального развития, жизнеспособности и размножения мышей.

2. Уровень протеинкиназы MAK-V часто увеличен в опухолях молочной железы человека и может использоваться как молекулярный маркер опухолей молочной железы человека.

3. Уровень транскрипта Pdcd4 часто снижен в опухолях плоскоклеточного рака легкого человека и может использоваться как молекулярный маркер плоскоклеточного рака легкого человека.

4. Выявлено частое несоответствие уровней транскрипта и белка Pdcd4 в опухолях плоскоклеточного рака легкого человека. Уровни транскрипта и белка Pdcd должны использоваться как независимые молекулярные параметры при плоскоклеточном раке легкого человека.

5. Супрессия транскрипта WIF1 при плоскоклеточном раке легкого человека сопровождается сопутствующим локальным снижением содержания белка WIF1 в ткани опухоли. Снижение экспрессии может использоваться как WIF молекулярный маркер плоскоклеточного рака легкого человека.

6. Экспрессия трансгена Pdcd4 «дикого» типа может не приводить к восстановлению активности Pdcd4 в опухолевых клетках. Рациональным способом восстановления активности Pdcd4 является использование мутантной версии белка Pdcd (S67,71,457A).

7. Созданные модули для экспрессии кДНК тимидинкиназы вируса простого герпеса 1 типа под контролем промотора теломеразной обратной транскриптазы человека hTERT -206…+37 и его модификации минимальным ранним промотором цитомегаловируса и рекомбинантные репликативно-дефектные аденовирусы на их основе вызывают ганцикловир-зависимое ингибирование роста опухолевых клеток и увеличивают эффективность действия традиционных химиотерапевтических препаратов (таксол, этопозид, цисплатин, доксорубицин) in vitro.

8. Модификация промотора теломеразной обратной транскриптазы человека hTERT 206…+37 минимальным ранним промотором цитомегаловируса способствует увеличению эффективности экспрессии трансгена под его контролем в широком спектре опухолевых клеток.

9. Использование областей транскриптов ДНК 3'-нетранслируемых метилтрансферазы 1 человека DNMT1 и топоизомеразы II человека TOPO2A, снижающих уровень транскрипта в неделящихся клетках, не оказывает существенного влияния на эффективность экспрессии трансгена и не приводит к снижению эффективности ганцикловир-зависимого ингибирования роста опухолевых клеток при экспрессии тимидинкиназы вируса простого герпеса типа. Использование 3'-нетранслируемых областей транскриптов DNMT1 и TOPO2A может быть рекомендовано для использования в генно-терапевтичских конструкциях для увеличения опухолевой специфичности экспрессии трансгена.

10. Установлена способность протеинкиназных ингибиторов LY294002 и LY увеличивать экспрессию рекомбинантных белков, кодируемых репликативно дефектными аденовирусами. Выявлено синергетическое действие LY294002 и LY303511 с ингибиторами топоизомеразы II этопозидом и топоизомеразы I камптотецином на увеличение экспрессии рекомбинантных белков, кодируемых репликативно-дефектными аденовирусами.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи 1. Korobko IV, Korobko EV, Kiselev SL. The MAK-V protein kinase regulates endocytosis in mouse. Mol Gen Genet. 2000;

264: 411-8.

Коробко ЕВ, Смирнова ЕВ, Киселев СЛ, Георгиев ГП, Коробко ИВ.

2.

Идентификация нового альтернативно сплайсированного транскрипта Рабаптина-5, взаимодействующего с протеинкиназой MAK-V. Докл. Акад.

Наук, 2000, 370: 119-121.

Коробко ИВ, Коробко ЕВ, Чупикова НИ, Ванечкин МА, Смирнова ЕВ, Киселев 3.

СЛ, Георгиев ГП. Использование двугибридного клонироваения в дрожжах для функциональной характеризации протеинкиназы MAK-V. Мол. Биол. 2002, 36:

491-495.

4. Korobko EV, Kiselev SL, Korobko IV. Multiple Rabaptin-5-like transcripts. Gene.

2002;

292: 191-197.

5. Ruzov AS, Mertsalov IB, Meehan R, Kiselev SL, Buchman VL, Korobko IV.

Cloning and developmental expression of MARK/Par-1/MELK-related protein kinase xMAK-V in Xenopus laevis. Dev Genes Evol. 2004;

214: 139-143.

6. Korobko EV, Kiselev SL, Korobko IV. Subcellular localization of MAK-V/Hunk protein kinase expressed in COS-1 cells. Cell Biol Int. 2004;

28: 49-56.

Коробко ИВ, Завалишина ЛЭ, Киселев СЛ, Райхлин НТ, Франк ГА. Продукция 7.

протеинкиназы MAK-V/Hunk как возможный диагностический и прогностический маркер рака молочной железы человека. Арх. Патол. 2004;

66:

6-9.

Коробко ЕВ, Чупикова НИ, Киселев СЛ, Коробко ИВ. Молекулярное 8.

клонирование и характеристика промотора гена mak-v/Hunk мыши. Мол. Биол.

2005, 39: 72-79.

Шепелев МВ, Коробко ЕВ, Коробко ИВ. WIF1: Перспективы применения в 9.

онкологии. Мол. Генет. Микробиол. Вирусол. 2006;

(4): 3-7.

Коробко ИВ, Коробко ЕВ, Нинкина НН, Бухман ВЛ, Киселев СЛ.

10.

Фосфорилирование протеинкиназы MAK-V в клетках млекопитающих. Докл.

Акад. Наук, 2007, 412: 555-557.

Коробко ЕВ, Калиниченко СВ, Шепелев МВ, Зборовская ИБ, Зиновьева МВ, 11.

Виноградова ТВ, Свердлов ЕД, Коробко ИВ. Супрессия транскрипта и белка WIF1 при немелкоклеточном раке легких. Мол. Генет. Микробиол. Вирусол.

2007;

(2): 13-18.

Калиниченко СВ, Коробко ЕВ, Коробко ИВ. Мембранная локализация 12.

протеинкиназы MAK-V. Биохимия. 2008;

73: 342-348.

13. Kalinichenko SV, Kopantzev EP, Korobko EV, Palgova IV, Zavalishina LE, Bateva MV, Petrov AN, Frank GA, Sverdlov ED, Korobko IV. Pdcd4 protein and mRNA level aterations do not correlate in human lung tumors. Lung Cancer. 2008;

62: 173 180.

Тезисы сообщений и докладов Коробко ИВ, Коробко ЕВ, Ванечкин МА, Райхлин НТ, Киселев СЛ, Георгиев 14.

ГП. Протеинкиназа MAK-V: на пути к функциональной характеристики и фссоциации ее с патологиями человека. материалы Международного симпозиума механизмы генетических процессов и "Молекулярные биотехнология" (18-21 ноября 2001 г., Москва;

22-24 ноября 2001 г., Минск), с.

85.

Коробко ИВ, Коробко ЕВ, Райхлин НТ, Ванечкин МА, Киселев СЛ. Новая 15.

протеинкиназа MAK-V и ее потенциальное применение в онкологии. Тезисы докладов Международной конференции РФФИ VI "Результаты Фундаментальных Исследований для Инвестиций. Молекулярная Медицина" (12-14 сентября 2001 г., Пущино), с. 62-63.

16. Korobko I, Korobko E, Kiselev S. Structural requirements for subcellular targeting of the ectopically expressed MAK-V/Hunk protein kinase. ELSO-2003 Conference (20 24 September 2003, Dresden, Germany),

Abstract

book, p. 178.

17. Korobko IV, Korobko EV, Chupikova NI, Kiselev SL. MAK-V/Hunk, the mammalian MARK/Par-1/Kin1-like proein kinase. International conference “Molecular genetics of eucaryotes” (4-7 February 2003, Moscow), abstract book, p.

4.

Коробко ЕВ, Шепелев МВ, Пальгова ИВ, Коробко ИВ. Разработка 18.

экспериментальных образцов систем дифференциальной диагностики плоскоклеточного рака легкого, основанных на экспрессии генов PDCD4, WIF- и MAK-V/HUNK. Тезисы семинара по комплексному проекту “Создание технологии дифференциальной протеомики и ее использование для получения новых противораковых препаратов”, выполняемому в рамках Федеральной целевой научно-технической программы “Исследования и разработки по приоритетным напрвлениям развития науки и техники” на 2002-2006 годы (20 21 октября 2005 г., Москва). Мол. Генет. Микробиол. Вирусол. 2006;

(3): 13.

Коробко ИВ. Супрессор опухолевого роста как мишень в 19. Pdcd противоопухолевой терапии. Материалы IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (11-15 мая 2008 г., Новосибирск), с. 242.

Коробко ИВ. Супрессор опухолевого роста Pdcd4 как мишень для генной 20.

терапии в онкологии. Материалы 5-ого Московского международного конгресса “Биотехнология: состояние и перспективы развития” (16-20 марта 2009 г., Москва), с. 72-73.

Патенты Коробко И.В., Коробко Е.В., Георгиев Г.П., Зборовская И.Б., Копанцев Е.П., 21.

Виноградова Т.В., Зиновьева М.В., Свердлов Е.Д. Способ диагностики немелкоклеточного рака легких и набор для его осуществления. Патент Российской Федерации на изобретение № 2330285, приоритет изобретения октября 2006 г., зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 27 июля 2008 г.



Pages:     | 1 ||
 




 
2013 www.netess.ru - «Бесплатная библиотека авторефератов кандидатских и докторских диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.